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荧光偏振免疫技术(Fluorescence Polarization Immunassay)——是荧光偏振法与免疫竞争法的结合。是一项相对较为成熟的技术。它利用荧光偏振原 理,采用竞争结合法机制,常用来监测小分子物质如药物、激素在样本中的含量。
以药物检测为例,以荧光素标记的药物和含待测药物的样本为抗原,与一定量的抗 体进行竞争性结合。荧光标记的药物在环境中旋转时,偏振荧光的强度与其受激发时分子转动的速度成反比。大分子物质旋转慢,发出的偏振荧光强;小分子物质旋 转快,其偏振荧光弱(去偏振现象)。因此,在竞争性结合过程中,样本中待测药物越多,与抗体结合的标志抗原就越少,抗原抗体复合物体积越大,旋转速率越 慢,从而激发的荧光偏振光度也就越少。当我们知道了已知浓度的标记抗原与荧光偏振光性的关系后就可以测量未知浓度的物质。
荧光偏振免疫技术类似于放射免疫竞争法,具有放免的特异性强,准确度高,敏感性好的特点,但又不同于放免测定周期长,也不需分离游离及结合的示踪物,也无放射性污染。荧光偏振免疫法,还具有均相酶免疫分析的各种优点,在试剂稳定性,精密度,灵敏度方面比酶免疫分析法更优。
应用荧光偏振免疫分析法与高效液相色谱法做对比,其检测结果呈正相关,r值为0.9041,p值小于0.001。由此可以看出荧光偏振免疫分析法,具有重复性好,灵敏度高,可实现快速全自动化等特点,在检测血药浓度/滥用药物浓度方面,具有独到的优势,是一项技术先进,实用性强,临床应用广宽的免疫分析方法。尤其适合小分子相的药物和激素检测。
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