[转帖]免疫标本的采集SOP

XXXX医院                             免疫实验室	文件编号： XXXX-XXX-SOP -01-01
标本的采集	版序：2005-1
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1．血液标本的采集。 （1）采血的时间      应尽可能地在应用抗菌素之前采血。最佳时间是当预料患者将要出现寒战或有一温度高峰时。建议取两个或三个血样培养，分别间隔1小时(假如治疗不能拖延，间隔时间可以短些)。三次以上的血培养很少需要。 重复培养的优点如下：     a.减少漏诊一过性菌血症的机; b.假如多次静脉穿刺术后发现腐物寄生菌（如表皮葡萄球菌），则可确定它们致病的作用。   （2）采血量 因为通常每毫升血所含的细菌数量小，所以采集合适的血量很重要，对成年人，每次抽血10ml；儿童2～5ml；婴幼儿和新生儿，常最多才能采到1-2ml。 （3）皮肤消毒      静脉穿刺部位应用杀菌消毒液仔细备皮：用碘酊、10％的聚烯吡酮碘，70％的酒精，或者70％的酒精中加用0．5％洗必太，在抽血前允许皮肤上的消毒剂挥发干，用过碘酊后，为避免可能的皮肤刺激，应用70％的酒精脱碘。      仔细备皮后，存在于深层皮肤的某些细菌仍会得到进入血液的机会，如表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌，甚至梭状芽胞杆菌的孢子。假菌血症(假阳性的血培养)可因应用污染的抗菌溶液、注射器或针头引起，如果在一家医院中，反复分离到一种不常见细菌(如葱头假单胞菌或沙雷氏菌)，则应高度怀疑院内感染，应加强调查。假如使用已采血供化学分析或测红细胞沉降速度的注射器，那么另一个污染的途径是针与非无菌的小瓶(或溶液)接触。 （4）抗凝剂      用聚乙烯磺酸钠(SPS)作为抗凝剂，因为它能抑制血清和吞噬细胞的抗细菌反应。如果血标本立即加入足量(50 ml)的液体培养基并充分混合而无凝块，则不需加抗凝剂。 2．脑脊液标本的采集      由临床医生进行腰椎或脑室穿刺，将约5～lOml的CSF分别收入两个无菌试管。考虑到有医源性感染的危险，对皮肤彻底消毒是必要的。部分CSF标本被用于细胞学和化学性检查，剩余的用于微生物学检查。应
将标本立即送往实验室，运送过程应快，因为细胞很快就会衰变，任何延误都会产生一个不能反映实际临床情况的细胞计数。 3．尿液标本的采集       采集清洁中段尿液，特别是对妇女、儿童，因为尿液本身就是一个很好的培养基，所以采集标本2小时内便应在验室内进行检验，或送到实验室前将标本冷藏于4℃的条件下，并不能超过18小时。需培养的尿标本应尽可能在早晨采集，可以要求病人头一天晚上不要排尿，坚持到采集尿液标本时。 女性患者：  能走动的女性患者应： （1） 用肥皂和清水彻底洗手，并用清洁的毛巾擦干。 （2） 在合适的房间脱衣，分开阴唇，用无菌的纱布垫和温肥皂水从前向后彻底擦洗外阴和阴唇。 （3） 用温水彻底冲洗并用一块无菌纱布垫擦干，在整个过程中，患者应将两侧的阴唇分开，手指不要接触已清洗过的部位。 （4）排尿，去掉第一段尿，将剩余的尿液接入无菌容器内。采好尿液后立即盖好容器盖子。         （5）把盛在密闭容器内的清洁中段尿交给护理人员，以便立即送往实验室。      对于卧床不起的病人，也进行同样的过程，不同的是，在要求病人排尿前要由一名护士协助。必要的话，应由护士亲自完成整个清洗过程。      在这两种情况下，都应进行各种努力把清洁的尿液收入无菌容器中，保证将有关标本和病人的有关信息、临床诊断和试验要求一起立即送往实验室。 男性患者 能走动的男性患者应注意以下几项：    （1）首先把手洗干净。    （2）包皮上翻(假如没有做过包皮环切术)，排出一小部分尿液。    （3）在包皮上翻状态下，把剩余的大部分尿液排入一个无菌容器，这就是中段尿标本。    （4）盖好容器盖，交给护理人员，以便立即送往实验室。    对于卧床不起的病人应注意：
（1）必要时，由护理人员将患者的包皮上翻，用肥皂水清洗阴茎头，并纱布擦干。 （2）在包皮上翻状态下，让患者把一小部分尿排到一个尿壶里。 （3）然后让患者把大部分的剩余尿排到无菌容器内，盖上容器盖，把标本送到实验室。 婴儿和儿童     收集在床上或不能配合的婴儿和儿童的清洁尿液比较困难。让患儿饮水或其它饮料，清洁外生殖器。让患儿坐在妈妈、护士或病房服务员的腿上，然后鼓励患儿排尿，并尽可能地把尿接入无菌容器，盖上盖子，并立即送到实验室检验。 4．大便标本的采集       应在疾病早期，使用抗生素之前，当粪便中有大量致病菌的时候采集大便标本。大便标本应收集到一个盖子紧密且带棉拭子的无菌试管内。标本送到实验室后，应尽快地进行检验。标本采集后的这一过程不能超过2小时。如标本不能立即检验，应保存于冰箱，棉拭子可放入无菌的5%甘油或缓冲甘油盐水保存液中。 5．痰液标本的采集       正常人体的下呼吸道是无菌的，上呼吸道有正常菌群。因下呼吸道的分泌物须经上呼吸道排出，常受该处的正常菌群的污染，也常有上呼吸道所特有的细菌。这一点请临床医生们在作痰液培养时所必须注意的，在嘱咐患者收集痰液时，应叫病人先嗽口后才采集标本，尽量减少口腔方面的细菌污染。痰液应尽量留取有病理成份的部份，为脓血，干酪样物等，以便提高培养的阳性率。 6．咽拭子的采集。      标本应由医生或其它经过培训的人员加以收集，病人应面朝亮光处坐，用压舌板压下舌头，用无菌棉拭子擦拭扁桃体、咽后壁、以及感染区域。小心不要接触舌或颊表面。最好在同一处用两个拭子擦拭。—个用作涂片，另一个放在无菌试管中送往检验科。 7．性传播疾病标本的采集。   （1）男性尿道炎标本的采集。       采集尿道中标本时，将直径较窄的无菌拭子插入尿道3～4cm，并在抽出前轻轻转动。浓性分泌物可用拭子采集。拭子头部和茎部的成分是很重要的。培养淋病奈瑟氏球菌时，标本应立即加以接种。肛门、直肠标本的采集可将拭子插入肛管4～5cm。口咽部的标本的采集，应将拭子擦拭后咽部和扁桃体隐窝，并立即加以培养。
为了分离淋病奈瑟氏球菌，理想的培养标本的方法是在临床上直接在培养剂上培养。培养皿应放在广口瓶中或在含5％一10％二氧化碳、高度湿度的介质中。如果不可能立即培养，应使用Amies或Stuart转运介质。转送时间，越短越好，在常温至30℃时应少于12个小时。应避免使用冰箱。 （2）女性生殖系统标本的采集。      用窥器作盆腔检查时应采集所有的标本。窥器在使用前应先用温水湿润，但不能用灭菌剂或妇科探查乳膏，因为这些对于淋球菌也许是致命的。为了检查酵母菌、阴道毛滴虫、以及细菌性阴道炎，应用拭子从阴道后穹窿中采集阴道分泌物标本。用于淋球菌和衣原体培养的样本应从子宫颈内膜处采集。放入窥器后，应将子宫颈粘液用棉球擦掉。应将采集标本用的拭子插入子宫颈口，并在抽出前至少转10秒钟。       采集尿道、直肠肛门、以及口咽部标本以查明淋球菌的方法同男性采集的方法一样。       所有盆腔感染的疾病(PID)，至少应采集子宫颈的标本以查明淋病奈瑟氏球菌。输卵管中的标本是可靠的，但盲管的抽出物是最好的标本。   （3）生殖道溃疡标本的采集。    梅毒密螺旋体：应戴防护性的外科用手套。用两个手指紧握溃疡部位，用纱布拭子沾生理盐水清理破损表面。如果有结痂则应加以清除。在擦掉第一滴血时(如存在的话)，用一完全干净的玻璃片接触破损表面以采集浆液性渗出物标本。立即将一干净的盖玻片覆盖渗出物标本。另外，也可用无菌针和注射器从破损处吸取标本，或从肿大的淋巴结处吸取标本。并应由检验科人员在暗视野的显微镜下立即对标本进行检查。 软性下疳嗜血杆菌：应用拭子从溃疡底部采集标本并直接在分离介质上加以培养。也可以从发炎的腹股沟淋巴结中吸取标本，但与从生殖道损伤处采集的标本相比，前者分离出软性下疳嗜血杆菌的成功率较小。      如果怀疑性病肉芽肿，应从肉芽肿活跃的区域的组织亚表层作一活检。用活检所得材料的一小部分作新鲜涂片。另外，也可从破损表面刮取材料做涂片。 8．化脓性渗出物，伤口以及脓肿标本的采集。      采集脓液和脓肿壁碎片用针头和针管吸取尽可能多的脓性物质，然后放在无菌标本容器中。如无此类容器，则应将标本保留在针管中，并将针头加帽，将针管送到检验科。检验科应对这一材料立即加以处理，同一标本应做厌氧需氧两种培养。
感染的撕裂伤，穿透伤，术后刀口，烧伤以及褥疮标本，在仔细清理伤口后，外科医生应观察采集脓液的表层下面，坏死的组织、气体的渗出(劈啪声)、或其它任何异常体症。用于培养的组织应予以清除，并放到纱布上，以备处理。应仔细采集脓液其它渗出物，并放到无菌试管中。如有必要，可用拭子。 窦道或淋巴结的排出，当窦道或淋巴结呈现自然排出的迹象时，应仔细收集排出的物质。用带橡皮球的无菌巴斯德吸管加以采集，并放至无菌试管中。如果排出不明显，外科医生应用无菌针管和针头或探针进行采集。同样，应尽可能避免使用拭子。 渗出物体液在某一体腔中，如腹膜腔、膝关节、或胸膜腔的异常累积，需要外科处理以吸取累积的体液，将其移至无菌容器中，以送至检验科做微生物和细胞学检查。某些情况下，当体液累积持续，并进行开放引流时，应使无菌方法采集排出液体，并进行进一步的培养和其他试验。 9．厌氧菌培养标本的采集。      要避免使用棉拭子取样，因为厌氧菌对空气和干燥非常敏感。培养厌氧菌用的标本应小心地从感染活性部位采取。某些标本的采集可能需要外科医生动手，尤其是用针管取脓，从感染的伤口、积脓或引流的脓肿取组织样品和／或脓样品。采集的标本应放在无菌的、十分密闭的容器中。如果没有这种容器，应将全部抽取的标本连同带针头的注射器立即送到检验科，针头用橡皮塞盖好或保护好。