[讨论]AU400做胆汁酸，定标通过，但标本测定则多为负值

今天我们科的AU400在测定TBA（总胆汁酸）时，发现大多数标本均为负值（偶然有几个做得出来的~但是测定值与临床不符），报警标志为“G”，即使重新复查标本也依然为负值。

然后重新定标，使用朗道校准品中、高两个浓度，均通过定标，而且与之前的每次定标想比较，均相差无几。然而再次复查标本时，依然是负值。

检查定标反应曲线正常，也跟以前的没什么明显差异，但是检查普通待测样本的反应曲线，发现加入R2后几乎还是一直平直，没有变化，换言之等于是几乎没有反应，再检查偶尔能做出结果的对应反应曲线，也是加入R2后稍微变化升起一点点，等于是发生微弱的反应而已。

以上可以证明试剂并无问题（我们使用的是四川迈克生产的总胆汁酸<循环酶法>双试剂，试剂没有过期，而且这种试剂使用1年多来，并没有出现过什么问题）。

以往从来没有出现过这样的情况，难道跟生化仪用水、标本取样的真空试管、还是跟定标物浓度有关？

又或者是临床用药所导致？可是没有理由啊，很多都是新收入的病人，入院检验结果未出来之前，临床一般都是不会给药的啊~~而且没理由全院大部分的病人都同时出现负值~

而且本机上并没有新开展的项目，之前的试剂摆放和测定顺序都是严格避免试剂间交叉污染而设定，所以也不存在试剂间交叉污染的情况。

定标物浓度中值是10点几，高值好象是20多~~（具体数值不记得了），而TBA的参考范围是0~10umol/L，难道是因为标本中TBA含量过低而导致检测结果为负值？可是以前也是这样使用，从来没有发生过这种情况。

还有一种可能是生化仪用水的问题，比如水质影响试剂空白，从而导致出现负值，但是为什么定标还是可以完美通过呢？而且跟前次定标没多少偏差（注：上次定标是6月份了，这段期间一直很稳定，直到今天）

另外，试剂经常更新，所以并没有试剂存放过久而导致测定结果负值这样的情况啊~

我下班走的时候他们正更换另一盒刚拆封的试剂，试重做几个样本，不知道结果如何？明天上班再去问问~~

PS.我曾经在生化轮转过1年，所以对这个很有兴趣，

所以，希望我们可以好好讨论一下，各位有遇到过类似情况的都进来说一下吧~~说说看还有什么原因，应该怎么解决呢？

还是试剂问题，从你描述的情况看，R1没有反应，R2也仅仅是微弱反应，这在现实工作中几乎不可能的，加样不够？显然不可能，你其他结果正常，那么就只有试剂了，前提是参数设定没有改变。你也提到要更换新的试剂，如果是从试剂瓶倒入上机试剂瓶内的情况，务必把上机试剂瓶清洗干净，如果是直接上机，则不必清洗。

定标参数如果最近跟以前比相差过大，则考虑定标液问题。水问题几乎不用考虑，因为有比TBA更敏感的项目。

谢谢管理员~！

刚才忘记说了，今天的质控结果也是在控的，而且跟平日里的也没有太大的差异，我们使用朗道的中、高值质控品，反应曲线也是正常的~

所以才觉得奇怪，下午换了新的一套试剂，直接上机，不知道结果怎么样了~然后还找了几个下头卫生院送上来检的标本（他们是用注射器抽血，然后分装在一次性塑料试管里送来的），做了下对比，明天上班再问问他们~

如果还是有问题，就得联系厂家咯~~

试剂问题最大，确定一下试剂是否放置错误，特别是把R2放错！

呵呵，没错，昨天就是一家医院的这个项目出了问题，负值，快晚上了叫我过去。我去了就换了一套试剂，定标校准后什么问题也没有。老师们还挺纳闷，仔细看过之后说知道了，两瓶试剂颠倒了。我倒是没注意呢。

老早说要回来说最后的解决方法的~~ 不过过了太久，具体的细节也不记得清楚了- -

其实也不是试剂问题，因为TBA的参考范围比较小，好像是0到20umol/L吧，然后定标物中、高值的浓度比这个参考范围还要高很多，而且重新检查定标曲线后发觉，虽然每次定标都通过，但是没有经过原点，这样，就导致肝功能正常的一般病人的TBA浓度值测不出，出现负值。

最后我们那位生化组长就把中值定标物做了稀释，然后用稀释后的定标物进行重新定标，一次就通过了，而且 也过了原点，自此，所有标本的 TBA测定都没有出现异常。

但是我想不通的是，为什么以前一直都很好，怎么突然就出了问题呢？PS.查了定标记录，出问题那天距离上一次的TBA定标是在07年的7月份……也是没有通过原点，可是一直很正常，而且出问题前，试剂也没有更换过批号，真是郁闷啊~~想不通啊想不通~

以前忘记说了，试剂也没有放错

我们几个人都检查过了的~~呵呵~~

不过我记得有一年，听说曾经有人把R2的小瓶放反了（就是试剂瓶较窄的部分放向试剂仓较宽的位置说，试剂瓶宽就塞进了仓内试剂位狭窄处，居然也能硬塞进试剂仓= =||

好像也是TBA这个项目的，好像检测试剂的时候AU400根本就没有报警，结果第二天做质控的时候就失控了~~

也是查了好久的原因才找出问题所在~ （那天我刚好值班不在，全是听说来的~~呵呵~~）

在一家兄弟医院中发现肝素钠成分的采血管会对tba测定有影响，结果多为负值或零，他们的试剂厂家记不清了，

但是具体试验我个人没有验证过，我们用的是北京华宇亿康的TBA，用肝素钠的采血管没有出现问题。

我们用的是含有促凝剂的血清生化采血管，应该对TBA或者是其他检验结果没有特别大的影响

就是刚用的时候发现促凝剂经常漂浮到血清液面上，怕会堵塞生化仪的样品针，所以得想办法去除——比如用棉签沾出来，或者是直接把血清分离出来再上机

后来或许是厂家改进了？反正促凝剂都老老实实的呆在管底，不再浮上来了~~

呵呵~

出现负值，为什么会出现负值呢？TBA的测算是A/min与标准值比值再乘上浓度，说明A变化有问题，不难查早原因

迈克试剂中血脂部分的试剂中明确含有对TBA测试的干扰成分，要是仪器的清洗有问题，在做过血脂后做TBA就会出现零值还有负值。这是去年12月份刚刚在一家医院解决的，换了一个厂家的血脂试剂就没有问题了。

我也来说说我的经历： 05年10月份北京安贞医院，AU2700，TBA负值，情况如楼主所说，查找了所有原因，而且把试剂拿到另外一个机器上做都没问题。实在想不通，最后都准备放弃了，忽然发现 AU2700的搅拌棒上有薄薄一层东西，建议停机清除搅拌棒污染，重新定标测定，质控样本良好。

06年在北京朝阳医院，LX20，TBA大约10%的结果是负值，经查这些人都是肝功有严重问题的，理应TBA较高。最后打印出几个负值样本的反应曲线，和校准曲线比较，发现负值曲线的斜率大大大于校准曲线的斜率，原来是由于值太高反而造成计算时产生的负值假象。把测定时间窗口延长即可解决。

楼上分析得很好，学习

进来学习一下

应该还是试剂方面的问题。

大家总会提出为什么测定会出现负值的问题，我从仪器角度解释一下测定数据是如何计算出来的，如果大家能熟悉这一计算过程，对于出 现负值的原因查找会有帮助。咱就以2点终点法为例子吧！

首先是吸光度度的计算。下图给出的是一个尿酸标本测定曲线，其中黑色圈内的测光点是我们计算用的，分别是15点与16点的吸光度 均值A1、33点与34点的吸光度均值A2。其公式为：

A=A2-K*A1

其中K为液量修正系数，其计算方法为 K=（S + R1）/（S+R1+R2）。S是标本量、R1、R2分别是试剂一、二的量。

这时我们得到吸光度A值后，开始浓度的计算：

浓度C =[K*（A—B）+C1]* IFA+IFB

其中B是S1ABS吸光度，也就是空白或第一标准液的吸光度。

C1是空白或是第一标准液浓度。

K是K系数，也就是下图中所做标准曲线的斜率（图中已标出）

IFA、IFB都是仪器常数，在一般情况下IFA=1，IFB=0，C1=0，所以该公式可以简化成C=K*（A—B）

K系数的计算是通过仪器测定S1（标准液1）、S2（标准液2）的A值以及给定的浓度来计算的。

通过以上计算我们可以知道结果为负值有两个环节可能出现，一是A2—K*A1时，第二是A — B（空白吸光度）时，前一种情况说明试剂质量完全失效，应更换。但是日常出现这样情况非常少见，而第二种情况是最多见的。所以为什么总是推荐大家每天做空白校正，就是这个原因。每天的试剂都在变化，试剂空白吸光度也在变化，这样既可以预防试剂过期，也可以减少被测物含量很低的标本出现负值的几率。

胆汁酸低值容易出现负值，血脂类的干扰是一个原因，还有一个就是水点的吸光度与校准液的吸光度拉的不够开有关系。 我最近的解决办法就是如果多次定标负值样本依旧出现，那无奈只好用手动较低试剂空白吸光度来解决了。

分析的很透彻

试剂空白有无反应，空白反应是否较大

没想到十多年过去了，还是有这个问题……