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IMx FK506操作步骤及注意事项
一、FK506试剂盒定标操作步骤 1、从冰箱拿出6个定标液(瓶上分别标示为A、B、C、D、E、F)和3个质控液 (瓶上分别标示为L、M、H),平衡到室温。
2、充分振荡混匀6个定标液和3个质控液后,立即精确吸取150μl每个样品分 别移液到相应的离心管中。
注意:吸液时,管中一定不要有气泡,确保样品量的准确性,且每次150μl 吸液后,必须要更换新的移液枪头
3、将150μl的全血沉降试剂分别移液到每个离心管后立即盖好管帽,用旋涡混 合仪高速旋转,确保每个样品充分混匀。
注意:离心管管底不能出现混合不彻底的沉淀物,如果有,则通过翻转和轻 敲管底使其活动起来,重新对样品进行高速旋转
4、将离心管放入离心机,离心时间和速度一定要保证(13000转,6分钟),以 便得到澄清透明的上清液。
5、将每个离心管中的上清液分别倒入一次性的反应杯中,从转盘上的位置1开 始,依次往后分别放入装有定标液A、B、C、D、E、F和质控液L、M、H 的离心后的上清液的反应杯,按机器面板上灰色的“CAL”键后,再按“RUN” 键,机器开始检测,30~40分钟后,将自动打印出检测结果。
注意:离心后,应在10分钟内将上清液倒入反应杯中,且反应杯的放置顺 序一定不能颠倒,转盘的1号位置必须放定标液A处理后的上清液
备注:1) 在做FK506试剂盒定标时,在预处理步骤中,可以在质控液后放置病人样本,其样品的前处理工作都一致,即在做试剂盒定标的同时,也可以测出病人的FK506血药浓度 2) 机器系统只能保存时间最近的一条标准曲线,当重新定标时,旧的标准曲线将会被覆盖
二、样品测试操作步骤 1、从冰箱拿出MODE1标准品(1瓶)和3个质控液,平衡到室温。
2、充分振荡混匀MODE1标准品,质控液和病人样本后,立即精确吸取150μl 每个样品分别移液到相应的离心管中。
3、将150μl的全血沉降试剂分别移液到每个离心管后立即盖好管帽,用旋涡混 合仪高速旋转,确保每个样品充分混匀。
4、将离心管放入离心机,离心时间和速度一定要保证(13000转,6分钟),以 便得到澄清透明的上清液。
5、将每个离心管中的上清液分别倒入一次性的反应杯中,从转盘上的位置1开 始,依次往后分别放入装有MODE1标准品,质控液和病人样本的离心后的 上清液的反应杯,直接按“RUN”键,机器开始检测,30~40分钟后,将自动打印出检测结果,且结果无需换算,测试单位为ng/ml。
三、试剂盒的注意事项 1、从冰箱里取出试剂盒,平衡到室温。
2、小心振荡混匀试剂盒,避免产生气泡,依次打开试剂盒瓶盖,放入机器内。
3、检测完毕后,立即从机器里取出试剂盒,盖紧瓶盖后放入冰箱。
四、机器附件操作注意事项 1、每天测试完所有样本后,分别用探针清洗液和无水乙醇清洗探针。然后冲洗 管路2-3次,倒空废液桶,保持机器内一直处于干燥的环境。
2、每次开机后,无需用探针清洗液清洗探针,只需用缓冲液冲洗管道2-3次。
3、机器运行前要目测是否至少有200ml MEIA#2缓冲液存在,若没有,则立 即更换稀释缓冲液瓶。
注意:检测运行中,不要向缓冲液瓶中添加稀释缓冲液,或者更换稀释缓冲 液瓶。
五、结果质量保证 1、每更换一个新批号试剂盒必须重新进行定标操作。
2、每一个试剂盒定完标后,为保证定标曲线的稳定性,最好在一个月内测试 完;且每一盘的运行必须放置MODE 1标准品和质控液,一旦MODE 1超 出参数范围(RATE值低于200),或者质控液的测出浓度超出其分别对应的浓度范围值,则必须重新定标,不得擅自修改仪器参数和自行换算结果。 质控液含有以下浓度范围值 瓶 | FK506浓度(ng/ml) | 范围值(ng/ml) | L | 5 | 3.0-7.0 | M | 11 | 7.7-14.3 | H | 22 | 15.4-28.6 |
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