网织红细胞分类与临床-->yeec转移

以日本Sysmex R-3000仪器为例，在分析血液细胞时，由于大小和RNA含量显著不同，血小板首先从成熟红细胞和网织红细胞的区域被区分出来；进而成RBC和网织红细胞也被分为两个区域，并且网织红细胞百分比和绝对值也计算出来了。计算机的运算曲线是适合荧光强度直方图测定网织红细胞的，荧光强度反映出成熟RBC与网织红细胞混合物中后者的细胞总数，R-3000／R-2000从RBC中分离网织红细胞的界限的设置，是以当次分析中成熟RBC的分布为依据。仪器显示出的散点图可以反映网织红细胞的成熟阶段，根据荧光强度，还可将网织红细胞分成 低荧光强度网织红细胞（Low Fluorescent Reticulocyte简称LFR）、中荧光强度网织红细胞（Middle Fluorescent Reticulocyte简称MFR）和高荧光强度网织红细胞（High Fluorescent Reticu1ocyte简称 HFR）部分。幼稚的网红显示最强的荧光，反之成熟红细胞极少或没有荧光。网织红细胞在临床上的应用大致为以下几个方面： 一、骨髓移植(BMT) RET数单项升高也不意味着造血功能的恢复， RBC生成正常的情况下，R-3000/R-2000很难在外周血中查见HFR这样的幼稚的网织红细胞，但造血受到刺激时，较多的不成熟细胞就从骨髓释入外周血，因此HFR的增长暗示着RBC生成的开始。也就是说，HFR变化较网织红细胞总数变化具有更重要的意义。 Batjer-JD等就此得出了深入的结论，他们用R-1000观察了30例异体、8例自体骨髓移植病人移植病人移植后44天内各项血液数变化，发现MFR＋HFR在13.31天均值开始回升，其次为WBC（14.8天），仪器法 :RBT绝对值（16.2天）和目测法RET绝对值（16.5天），提示MFR＋HFR是估计移植后造血恢复的早期指标。 J·Kanold等发现，自体、异体移植后HFR的出现（至少两次成功计数达到2％或0.1X10e9/L）早于 RET数绝对值达到20X10e9／L，也比单核细胞达到0.05X10e9L、RET数达20X10e9/L，以及中性粒细胞 达到0.5X10e9／L都要早，如图13所示。所以，评估BMT后的红细胞生成情况，HFR计数提供了早期 测量依据，同时也比监测单核细胞水平更为精确和实际。 二、贫 血 对骨髓移植患者的研究证实HFR和MFR可能是反映造血功能的关键的新参数， Kojima等人在贫患者也得出同样的结论，以Hb120～160g／L、MCV 90～100f1、MCH 27～34pg的患者作为健康组； WBC＜3X10e9／L、PLT＜50X10e9／L的化疗后红细胞生成抑制者为骨髓抑制组，以慢性溶血性贫血患者为 溶贫组，测得的网织红细胞数、HFR及LFR项参数有力地支持了上述结论。与贫血组相 似，血液透析组HGB为100g／L或更低，HFR上升，LPR下降，但是RET数不升高；因此，可将网织红细计数及其分类作为鉴别诊断的初筛指标。老年健康组与健康对照组具有相似的特征，说明这些参数无年 龄差异。老年贫血组RET数减少，但RET％却与健康组相似。 三、海洋性贫血 G.Paterakis等的研究显示，海洋性贫血杂合体RET％和RET＃明显高于正常对照，所以建立健康（24～44y)RET％参考值时应注意排除Hb正常的杂合体。正常者RET％虽无性别上的明显差异，但女性偏高。网织红细胞分类（HFR、 MFR、 LFR）无性别差异。正常人与杂合体贫血的HFR、 MFR、LFR 也无显著差异，故建立参考值时不必排除地贫。异性间由于RBC计数的不同而存在着网织红细胞计数的 不同，但杂合体女性RET％明显高于男性（P＜0．001）。因此，贫血杂合体男女两性RET数的不同无显著意义。 众所周知，地贫以无效造血和红细胞寿命缩短为特点，网织红细胞计数与HGB水平变化相反，轻度贫血或非贫血病人，网织红细胞增长可能非常细微以至手工计数察觉不到，而使用精确的自动计数技术 明显多了。 四、骨髓增生异常综合征（MDS） 一般说来，MFR在HFR之前进入循环，暗示红细胞生成规律性恢复的开始。L.Kuse认为：少量 MFR可以作为MDS化疗后粒系恢复的早期指标，且比RET绝对值更敏感。 五、放疗与化疗 通过流式法网织红细胞分析可获得骨髓增生特别是红系增生及放、化疗的细胞毒副作用的信息在造 血反应中（如叶酸和VitB12)治疗后或化疗后造血恢复中可见网织红细胞短暂迅速的增高。 当HGB下降、组织氧化受阻时，EPO生成增多，EPO促使干细胞向原始红细胞分化，也加速网织红 细胞释放。因此，EPO增加，HFR也增多，并伴有网织红细胞的增多。化疗后骨髓EPO功能恢复早期 HPR增多比网织红细胞总数恢复早，这种反应时间的不同体现了EPO与HFR之间的密切关系。 另有实验表明长期接受Cisplatin化疗的卵巢癌患者网织红细胞计数往往在HGB减少之前上升。 Mugurama等应用Sysmex R一1000系统观察了27例白血病和淋巴瘤患者化疗期间网织红细胞亚群的 变化，发现有14例（3.89％）在化疗开始时HFR和（或）MFR早 于LFR，中性粒细胞及血小板降低，HFR、MFR与其它参数同时 降低为57．2％，在骨髓恢复期，52．8％的病例HFR和／或MFR 迅速升高，WBC、PLT同时升高的仅占25％，提示幼稚网织红细 胞变化是造血系统肿瘤化疗时，骨髓受抑制和恢复较敏感指标。，抗白血病药物对红细胞生成的抑制使 RET绝对值降至几乎为零，HFR显著上升提示着患者进入恢复 期。 Kageoka等用R-3000分析发现末梢血网织红计数优于白细胞计数和血小板计数分析骨髓造血状态。在化疗后，骨髓抑制的恢复早期末梢血HFR升高出现较早，骨髓RET％高于末梢血的3倍，巨幼贫、MDS或DIC的病人骨 髓RET％均较末梢血有明显的增高。