[求助]对于一点终点法，单试剂，7060上放于R1和R2有区别吗？反应时间和测光点要调整吗？

总蛋白，单 试剂，一点终点法检测，试剂放于7060的R2，反应时间10分钟，测光点31，反应曲线好象不太对，前四个点还未加试剂，到了5点吸光度怎么突然降了，后又上升是没错啦，但怎么跟前四点未加试剂时没有很大的差别呢？有没有需要调整的地方？这个反应曲线有问题吗？大家给点意见。

首先回答R1、R2的问题，如果像你这种情况，试剂还是放在R1比较合理，因为如果放在R2就不能保证反应时间是10分钟了，只有 8.5分钟，对吧？而且把样品加到反应杯中时间过长再加试剂也不是个好的选择。

其次关于反应曲线的问题，之所以第五点的吸光度值突然降下来，是由于把第一试剂放在R2加后，前四个点测的是样品与空气的吸光度值，加入试剂后的吸光度值在546nm下要低于空气的吸光度值。

赞同楼上所说，建议将单试剂设置在R1位上

但是实在没位置了，还是可以这样做的。

有区别啊，放R2反映时间不能达到正确位置啊！

学习中

说是没有用的，只有做两种设置方法的比对试验来说明问题

在某些项目上是可以的，比如说总蛋白，白蛋白，我这里就是反应时间短的放在R2上，可以腾出一个通道。有的项目虽然试剂盒上说明是10分钟反应时间，其实5分钟就到终点了，后面5分钟的时间吸光度变化可忽略不计。一定要看质控是否在控。

关键是反映是否能到平衡！总蛋白一般反映时间较长，不建议放至R2位置测试。

白蛋白，甘油三脂，胆固醇等都可以的。一般2分钟就到终点了。

不赞同楼上所说！

如果测试高值血清，达到终点的时间也相应延长，为了节约通道而缩短反应时间可能导致反应达不到终点，从而影响结果。

可以肯定地告诉大家，设定参数和图形均没有问题，设置参数的人肯定是比较精通生化的高手，在试剂位不够的情况下，用这种方式来变通是可以的，我们知道总蛋白的反应在8分钟已经反应了97%以上了，在标准品和样本同等反应的条件下，只要做了定标，结果肯定没有问题，不信大家可以用一个100多克每升浓度的样本做一个系列稀释，然后分别检测（从低到高），评估其检测线性即可。另外，关于图形问题，一楼说的不是很准确，试剂定义为R2，放置的位置肯定是在第二试剂盘，应R1、4试剂放在第一盘，R2、4试剂放在第二盘，仪器运行时序为加样品——加R1——加R2——加R3——加R4，真正测吸光度是从反应杯清洗完成后，杯清洁度检查时开始，只是查反应曲线时该吸光度该点没表达出来，前四个点吸光度试剂是空杯的吸光度，加入的极少（2-3UL）样本根本测不到，光线透过的是空气，空气的消光系数比试剂要大，试剂加入时间是在第4、5点之间，所以表现为第5点吸光度较第4点低。总的来说，还有调整余地，反应时间长的尽量放R1，短的可以放R2或R3，具体还要看测试项目，检测方法及试剂针的交叉污染情况来定

真详细，学习到了

高手！

zhuqiang回答的好

赞同

对于部分项目是可以的，但是白蛋白肯定不行，你可以做实验看看

试剂在R2加入时，样本已经在样品盘中运行90S左右，如果样品量太小，会造成样本蒸发，结果的重复性不好

不错，这个问题值得讨论。

用R2加入也是没办法中的办法了，经济效益与质量发生冲突时，你会选择哪边呢？