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源德化学发光实验操作注意事项
实验操作
1: 在血标本的采取过程中,一定要避免(溶血)的发生,因为(溶血)会使标本的发光值增加,影响测值结果。
2: 检测最好是用当天采取的新鲜标本,如果是4℃保存的标本,在正式做试验之前,一定要恢复到室温,特别是-20℃冻存的标本,在检测的前一天应先在(4℃)放置过夜,在检测当天再按正常操作恢复到室温。
注1:做E2病人的血样时,血样必须经过冻存才可以进行检测,如果当天抽的血需要马上检测时,放到放到-20度(冷冻)1-2小时之后拿出之后在进行检测。
注2:作甲状腺病人的血样时,如果抽完血后当天检测,放在室温就可以,如果隔天做或是需要保存,不能放到4度保存,必须放到-20度(冷冻)保存。
3: 对于新批号的试剂盒,一定要(自建)曲线,待曲线结果稳定以后,可以根据试剂盒的实际情况选用单点/双点校正。
4: 判断曲线是否可以使用的标准是(曲线的相关系数大于0.99)。
5: 在加样的过程中,应该注意加取不同的标本和校准品一定要更换新的吸头,在加酶结合物和反应抗体的时候可以不换吸头,但是一定要避免吸头被污染。
6: 检测FT3、FT4、TT3、TT4、睾酮、孕酮、雌二醇等小分子物质时,加样的顺序是(校准品/血清标本→酶结合物→反应抗体)。
7: 所有的试剂都应使用(加样器)来加取。
8: 反应条件如果选用室温振荡,则室温应维持在(20-25℃);如果选用37℃水浴,则液面一定要(淹没过板架1/2高度以下)。
9: 反应结束后或两步法的试验过程中,在洗板之前一定要尽量甩去反应杯中的液体,并极可能在吸水纸上拍干。
10: 洗板的次数为(5)次,每次时间(10秒钟)。
11: 最后一次洗板后,一定要尽量甩去反应杯中的液体,并极可能在吸水纸上拍干。反应杯中避免产生气泡,如有捅破之后再加入发光液。
12: 浓缩洗涤液要用(蒸馏水)稀释,严禁用(自来水或纯净水)稀释。
13: 每个反应杯加发光液的间隔时间要尽可能缩短,96孔板加发光液的时间最好不要超过(2分钟)。
14: 加好发光液后,微孔板应在(避光处)放置,然后根据试剂盒要求的时间进行检测。一般是5-10钟之内检测
注1:做甲状腺五项,加入发光液时最好提前混匀。(混匀方法:计算出需要加入的发光液的量,然后将A液,B液按1:1混匀,每孔用加样枪加入100μl)
15: 每次检测时,必须自建曲线或者根据不同试剂盒采用IC卡曲线或载入曲线并配合单双点校正的方式。如利用IC卡曲线或载入曲线而不使用校正,则不能保证测量结果的准确性。
16: 不同批号的试剂禁止混用。
注1:做HCG病人的血样时,是否需要稀释来做应跟临床沟通来做。
注2:做APF病人的血样时,按说明书进行稀释来做。最后化验单上打印的结果是稀释完之后的结果。临床应根据稀释倍数进行回算。 注3:做CA153病人血样时,病人样品必须用生理盐水全部进行1:20稀释,最后化验单上打印的结果就是病人的真实结果,不需要换算。
结果与临床
17: 不同试剂厂商的试剂对同一份血清标本的测量结果会有差异,因此要根据不同试剂厂商提供的正常参考值范围进行判断,不同试剂的测量结果之间在数值上没有可比性。
18: 正常参考值是指(95%-99%的正常人群某一指标测量结果的所在范围)。
19: 具有双侧正常值的检测项目必须使用(双点校正),具有单侧正常值的检测项目可以选择(单点校正),校正点的选择的标准是(在正常值附近选择适合浓度的校准品点)。 |