[转帖]酶免疫分析方法

酶标记抗体技术是将抗原和抗体的特异性反应与酶的催化作用有机地结合的一种新技术。现已广泛应用于各种抗原和抗体的定性、定量测定。最初的免疫酶测定法，是使酶与抗原或体结合，用以检查组织中相应的抗原或抗体的存在。后来发展为将抗原或抗体吸附于固相载体，在载体上进行免疫酶染色，底物显色用肉眼或分光光度仪判定。这后一种技术就是目前应用最广的酶联免疫吸附试验，即
ELISA 。

免疫酶技术就是抗原和抗体的免疫反应和酶的催化反应相结合而建立的一种新技术。酶与抗原或抗体相结合后，既不改变抗原或抗体的免疫学反应特性，也不影响酶本身的酶学活性，即在相应而合适的作用底物参与下，使基质水解而显色，或使供氢体由无色的还原型变为有色的氧化型。这种有色产物可用目测或光学显微镜和电子显微镜观察，也可用分光光度仪加以检测。显色反应显示了酶的存在，从而证明发生了相应的免疫反应。因而这是一种特异而敏感的技术，可以在细胞或亚细胞水平示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其定量。

至今，所应用的酶大多是辣根过氧化物酶，其次有碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等。每种酶通过与自己的特殊作用底物反应，而产生典型的有色沉淀物。

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