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碱性磷酸酶(ALP) 检测试剂盒
IFCC推荐法
【用途】
本品仅用于体外测定血清或血浆中碱性磷酸酶(ALP)的活性。
【临床意义】
碱性磷酸酶几乎存在于人体的各个组织中，以骨骼、肾脏和肝脏中含量较多。正常人血清中的ALP主要来自骨骼，由成骨细胞产生，故骨骼疾病、特别是当有新骨质生成时和正在生长的儿童期，血液内的ALP活性增高。因为酶由肝脏排泄，且有部分酶来自肝脏，故肝胆疾病特别是胆道堵塞时ALP活性也增高。
【原理】
本试剂测定原理是IFCC推荐的方法，该法采用对-硝基苯磷酸盐为底物，底物在碱性条件下经样本中的ALP催化形成对-硝基酚及磷酸。通过测定405nm处吸光度的变化率计算出ALP的活性。
对-硝基苯磷酸盐+AMP ALP 对-硝基苯酚+磷酸
【试剂规格】
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货号 |
AL2070 |
AL2074 |
AL2076 |
AL2077 |
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试剂A |
2 x 40mL |
4 x 50 mL |
4x 80 mL |
4 x 60mL |
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试剂B |
2 x 10mL |
1 x 50 mL |
1 x 80 mL |
1 x 60mL |
【试剂成分】
试剂A: AMP pH 10.4 0.35 mol/L
硫酸锌 1 mmol/L
对-硝基苯磷酸盐 2 mmol/L
醋酸镁 2 mmol/L
试剂B: 4 -NPP 12 mmol/L
AMP pH 10.4 0.35 mol/L
含非反应性填充物及稳定剂。
【适用仪器】
适用于各种类型的半自动、全自动生化分析仪。
【样本要求】
血清或血浆，在2-8oC保存样本中的ALP可稳定7天。
【测试步骤】
1、测定器材：具有405nm波长的分析仪、定时器、加样器。
2、工作液配置：本试剂为液体试剂，可直接使用；也可配成单一试剂使用，取试剂A和试剂B按4：1比例混合即成工作液。此工作液密闭避光保存2-8oC可稳定1个月。
3、测定条件：（双试剂模式手工参数）
温度：37oC 试剂A用量：0.8 mL
波长：405nm 试剂B用量：0.2 mL
吸光度范围：0-2.5ABS 样本用量：0.02mL
比色杯光径：1cm 测定模式：速率法
延迟时间：60S 测定时间：60S
4、操作步骤：
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样本管 |
质控管 |
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试剂A |
0.8mL |
0.8mL |
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样本/质控管 |
20 μL |
20 μL |
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混匀， 37oC 孵育3分钟 |
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试剂B |
0.2mL |
0.2mL |
充分混匀后,恒温1分钟时测定初始吸光度，然后在2
分钟时准确测定平均每分钟吸光度的变化值ΔA/min。
【计算】
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样本ALP活力（U/L） = |
ΔA/min x Vt x 106 |
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ε x Vs x 1 |
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= |
ΔA/min x F |
37oC理论因数F值= 2767、1为光径1cm
Vt=反应体积、Vs=样品体积
4-硝基苯酚在405nm的消光系数ε为18450
【参考值】
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反应温度 |
男性 |
女性 |
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37oC |
53-125 U/L |
42-105 U/L |
引用的参考值为本法的期望值，建议各实验室验证或建立自己的参考范围。
【质控】
推荐使用公司配套质控血清，每个实验室应建立自己的质控管理，并且纠正失控的测试项目。
【性能指标】
1、线性范围：1200U/L，对于高值结果用蒸馏水稀释2倍重新测定.结果乘以稀释倍数。
2、按说明书方法，灵敏度0.362ΔmABS/min相当于1.0 U/LALP。
3、抗干扰性：脂血(甘油三酯< 10 g/L)和胆红素< 20 mg/dL不对结果有干扰。血红蛋白> 2.5 g/L 对结果有影响，某些药物和物质可能干扰该实验。
【试剂的保存】
在2-8oC避光保存，有效期内稳定。若试剂出现颗粒物质、浑浊或在405nm(1cm光径)处空白吸光度>0.8时，请不要使用。
【注意事项】
1、试剂和样本的用量可根据需要按比例改变。
2、请使用校准过的仪器检测，使用不同的仪器和操作方法均可导致结果的不同。
3、单位换算：U/L×16.67=μkat/L×1000。
【参考文献】
1.
注 册 号：京药监械（准）字2005第2400326号
执行标准：YZB/京0504-2004 版本号200511
免费客服电话：800-810-1255
执行标准： |
IFCC methods for the measurement of catalytic concentration ofenzymes. Part 5: IFCC methods for alkaline phosphatase. J Clin ChemClin Biochem 1983; 21: 731-748。
老师，比如这个试剂盒，该怎么配置标准管啊？
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