[求助]CRP出现负值

最近一段时间在AU400上面做CRP都出现负值，但是反测校准品和高值标本反应曲线又是正常的。

换了新批号试剂和新批号校准品后，结果依然如此。

这张是负值标本的反应曲线，除了高值外，大量结果的反应曲线都近乎直线。

这是高值标本的反应曲线

请问是何原因导致？

 图片没传上来

上一个是大多数标本的反应曲线

这一张是高值标本的

图片传了很多次了，咋还传不上来呢？论坛上有如何上传图片的帖子，去看一下。

这个是大多数标本出现负值的图

请老师们指教！

1 这种现象似乎在使用免疫比浊法（多个浓度值标准液，条样校标）时容易出现，不同浓度值标准液是不是自己手工稀释的，考虑一下标准液的稀释浓度是否合理。

2 有时如果样本反应吸光度比校标时最低那一点的标准液反应吸光度还要低，那就会出现负值，而且在这个值后面会有“G”的标志。

你注意看看是否有上述两种情况。

回龙老师：

1·校准品为试剂自带5个浓度，并且重新购买新的校准品后，校准结果基本一致，反应曲线良好（高值标本或反测校准品曲线都良好）。

2·出现负值肯定是样本反应吸光度比校标时最低那一点的标准液反应吸光度还要低。

但是什么原因引起样本反应吸光度低呢？加样？仪器？还是……

 把有问题的曲线传上来看一下就知道了，可惜你一直没传上来。参考这个帖子帮你上传https://www.yeec.com/forum.php?mod=viewthread&tid=4931&page=1

这是大多数标本的曲线

这是高值标本的曲线

请老师们指点

仔细看图，R2加入的时候根本没有起反应，一条直线就过来了。是试剂没加进去还是底物耗尽，还是R液面探测误判导致没有吸引R2？高值的标本倒是正常的反应曲线，你可以把负值标本稀释10倍以上重测看是什么图形？稀释后图形正常的话就是底物耗尽，不正常观察R液面探测是否误判，试剂瓶口是否有气泡水膜，防静电刷是否太脏等等。如果R针探测正常，只能从试剂和参数着手了。

从反应曲线看明显反应度不够，核对参数设置中波长这一项，最好执行一下W2后做光电校正，再试着改变一下样品试剂比例看看情况如何？加大样品加入量，试剂量不变。

请楼主把信息说得更详细些：比如参数信息（主波长340nm副波长看不清楚、样品试剂比、校准类型）、试剂信息（试剂厂家、胶乳试剂是R1还是R2？还是是双胶乳试剂？）、标本信息（何种抗凝剂？是否溶血、黄疸、脂浊标本？）。最好将校准曲线也发上来看看。可以考虑以下因素：

基质效应：我以前碰到过这种情况，是将0浓度校准品换成生理盐水重新校准，也可以适当加大样品量。

标本因素：脂浊标本和溶血标本也容易出现0值和负值。从你发上来的反应曲线看，负值标本反应曲线第10点ABS大于了第27点ABS，ABS变化值-0.0116,肯定小于了0浓度的ABS变化值，奇怪的是R1和标本混合后有一个先升后降的反应曲线，这与高值标本的反应曲线不同。

试剂因素：R1、R2是否放错位置，试剂是否开瓶过久？

 

 

做了10份标本，除了其中一份高值曲线是正常外，其它标本都是负值，曲线都不理想。

CRP是没有胶乳的，底物耗尽可能性相当小。副波长是700，340和700nm的其它项目结果都良好。

定标曲线就不对，查试剂和参数吧。

这是参数

仔细确认一下R1R2是否放置颠倒，必要时重新开瓶新的试剂再试。

电话与迈克公司确认，样本量17ul是否准确，确实太高了。

其他的参数没发现什么具体的问题。上述两点足以使曲线如此，并且定标也是不对的。

请教郑老师：为什么说定标曲线不对呢？从何看出？

把你的仪器保养一下，尤其注意样品针、试剂针、搅拌棒的清洗，可能存在交叉污染的情况。试剂二使用前充分混匀，但不能有气泡。密切关注2试剂针的加样动作有无异常。最后关注试剂是否有问题，找台别的仪器用用试试，如果同样说明试剂有问题。我以前遇到过类似事情，尤其是免疫比浊法的，新批号试剂结果太差，全面检查未发现问题，最后联系厂家，厂家说抽查该批号试剂用与我们同样仪器做，下午回电话说确实试剂存在问题，重新邮寄新试剂才得以解决。

校准液失效？你买了多久了？