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[求助]速率法A与两点法、终点法的原理各是什么?区别在哪里?

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肖华勇 发表于 2009-12-2 23:32 | 显示全部楼层 |阅读模式

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各位大虾:请问速率法A与两点法、终点法的原理各是什么?区别在哪里?迷惘中,请指教!

1。速率法,有叫动态法,仪器连续检测生化反应过程中的吸光度变化,目的是得到吸光度变化速率。酶活性的检测大多用此方法。检测底物的是下降反应,又叫负反应,例如:ALT AST 等;检测生成物的是上升反应,又叫正反应,ALP。

2。终点法。仪器检测生化反应某一时间点的吸光度值,目的得到反应溶液的具体吸光度值。常见的有GLU、TP 、ALB 等

3。两点法。仪器检测生化反应两个时间点的吸光度值,第二点减去第一点,得到吸光度的差值,检测底物的差值为负,检测生成物的差值为正,例如,中生试剂的肌酐项目Cr。

生化仪无论半自动或全自动,都有实验参数设置,只要按试剂说明正确设置,再照试剂说明做实验就行了。使用分光光度计另当别论。

两点法:又称为一级动力学法、固定时间法等,指在一定的反应时间内,反应速度与底物浓度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期。

两点法不是什么终点法中的两点法,准确地说它应该属于动态法范畴,一种带标准的动态法

查了一下,就是上面的,还是不能完全理解,仪器连续检测生化反应过程中的吸光度变化,这个反应过程是检测多少个点?譬如在日本7600上ALT是21点到31点是21、22、23、24..............31这11个点的吸光度变化。TP是15点和34点怎么理解?是34点的吸光度减去15点吗?


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郑振寰 发表于 2009-12-3 09:55 | 显示全部楼层

你应该看日本机器的中文操作手册,上面非常清楚的告诉你各个检测方法的区别。

在手册中,除了给你各种方法的解释,还给你了计算公式。中文解释也许是翻译公司翻译的,可能晦涩难懂,但公式却是一目了然的。

日本机器不同的型号不同的方法测光点数目也不同,一般最多有6个,按照前后顺序依次编号为I、m、n、p、q、r,而这些点并不是都用到浓度计算上,有的是用在试剂空白消除上,有的是用在样本底色的消除上,真正用到计算的,也就两个点。两点速率法,只是通过公式计算两点间的每分钟吸光度变化计算得出浓度的变化。而2点终点法则是第二点减去第一点的吸光度,再进行浓度计算。

看说明书吧,没有比这个再权威的了。虽然难懂,但毕竟有据可查,还是能看懂的。

看贴要回是本分,有问必答是人才,解决问题回贴是公德.
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站站站 发表于 2011-7-24 02:03 | 显示全部楼层
谢谢分析!!!
chinavy 发表于 2011-10-7 09:32 | 显示全部楼层
有没有人有日本的详细电子版说明书啊?我也没弄清楚这个。
安定的心 发表于 2011-12-5 20:22 | 显示全部楼层
还是不清楚
岳世海 发表于 2011-12-6 22:12 | 显示全部楼层
任意找一份大厂生化仪的正规操作手册,最好进口仪器,英文原版操作手册(例如7020,AU400等等),都有一个章节详细解释反应监测方法。详细读一下,细嚼慢咽,理解透,所有的生化都可以理解了。
s903243951 发表于 2017-12-17 20:51 | 显示全部楼层
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wzd1990 发表于 2022-12-20 20:54 | 显示全部楼层
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wang888888 发表于 2022-12-22 23:49 | 显示全部楼层

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