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OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪反应曲线图的意义分析
王宏碧 ，刘云华z，崔江龙 ，张小莲 ，巢玲
f1、江西省宜春市人民医院检验科336000；2、江西省宜春市中心血站336000)
中图分类号R446．1 1+2，0213．1 文献标识码B 文章编号1674—1129(2009)05—0535—03
随着全自动生化分析仪的广泛应用．临床实验室的检测能力和检验质量有了日益的发展和提高 在使用OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪的工作中． 我们对AU2700反应曲线图进行了观察分析．总结出一些反应曲线图所表达的意义．能够帮助我们及时、正确地解决日常工作中出现的许多问题。先从AU2700的操作电脑上打印出以下的图，再通过扫描到本文中与大家一起探讨：
1进入到反应曲线图fReaction Monitor)界面
1．1 在OLYMPUS AU2700操作电脑Standbv主界面的Routine菜单里，选择子菜单(R)Reaction Monitor打开．选定需要查看的条件后．点击Search data进入到Reaction Monitor界面。
1．2 反应曲线图(Reaction Monitor图)Wave Length显示测试的主副波长 Reaction Monitor图是以Point(0 27个反应测试时间点1为横座标，AU2700数据计算共有0～27个测试点，每隔18秒一个测试点；以OD值f测试吸光度)为纵座标；由0-27个测试点的React OD值连成的反应曲线图 可以直观地反映测试的全过程 还可通过点击Data Displv显示在已设置的主副波长下每一测试点0D值、Reacti0n OD值、RB 0D值(试剂空白OD值)，还有Max OD值、Min OD值、Reat OD值、Photocal值。根据Reaction Monitor图形、数据、试剂空白、定标和室内质控等内容．通过观察分析我们可以找到一些问题的原因f甚至是仪器没有报警显示的问题)正确及时地加以解决．从而保证检测的质量
2 反应曲线图Reaction Monitor)的意义分析
2．1 反应样品针、试剂针、搅拌棒、比色杯的污染全自动生化分析仪由于共用吸样针、试剂针、搅拌棒、比色杯，长期使用致其清洗能力下降，磨损、老化后引起吸附力增加，仪器内污垢积聚：或和测试顺序安排不当，且常规清洗不能有效清除交叉污染时．就会增加污染的可能性引起结果偏高或偏低。在反应曲线图的O～2点、10 12点间可出现干扰性“台阶”。见图2
光电校正可自动监测并记录比色杯的空白吸光度．当比色杯老化、污染、磨损后比色杯空白会升高，出现红色需清洗．绿色需更换比色杯。监测比色杯的空白吸光度值的变化。
图1 单试剂终点法的正常反应曲线图
对于保证测定结果的重复性和准确性非常重要。上图l是单试剂终点法的正常反应曲线图．类似的测试项目有TP，ALB，Ca，P，Mg等。0点加人试剂测OD值，l～2点间加入样品紧接着搅拌棒混匀，试剂和样品反应，在0～2点间OD值升高出现曲线上升．5 27点反应逐渐达到平衡呈一条直线。
上图2是偶氮砷Ⅲ法单试剂测定钙离子的一个Reaction Monitor图。因本批次标本和质控钙离子结果都为负数．仪器并没有出现报警显示．更换试剂定标后重测标本和质控结果仍为负数，观察反映曲线图2。试剂空白值升高，并在0～2点间（加入试剂和样品紧接R1搅拌棒混匀)，React OD值升高，图上出现一个向上的“小台阶”．10-12点间(R2搅拌棒混匀），出现了一个干扰性“台阶”．考虑为搅拌混匀过程中有污染．取下搅拌棒清洗，发现搅拌棒上E纤维蛋白和试剂粘附。
清洗搅拌棒重新定标后测试标本见Reaction Monitor图3，在10～12测试点间没有了“台阶”，室内质控结果在控．处理后的测试结果可以报告
2．2 反应试剂的质量
试剂的变质、过期、错误放置会影响检测结果，通过反应曲线图和试剂空白值的变化情况可进行初步监测 空白吸光度的变化是试剂化学变化的外部反映，不同项目、方法、批号或储存时问不同的试剂空白吸光值不一样 如含有酚类试剂，会因酚的氧化而逐渐呈现红色或黄色：含蛋白质试剂久置后会变浑浊，这些情况均可使空白吸光度值升高 以NAD(P)H转化为NAD(P)为反应原理的试剂，在放置过程中空白吸光度值会因NAD(p)H自行氧化为NAD(p)下降 。
上图4是双缩脲法测定一个标本TP含量的Rcaction Monitor图。此标本TP的React OD为0．785异常高．回顾以往60g／L的TP标准液在第2反应测试点的OD值为0．180～0．185，TP试剂空白OD值在0．07~0．o9的情况：而且本批次标本、室内质控TP结果~>150g／L．试剂空白OD值在0．25～0．31，考虑试剂存在问题。打开试剂仓发现ALB试剂放在TP试剂位，TP试剂放在ALB试剂位 重新放置试剂定标后的标本复查结果见图5
图5 重新放置试剂定标后复查图
React OD值0．1861。 rP结果63．5mmo1／L．试剂空向OD值0．0723，室内质控结果在控，结果可以报告。
2-3 反应异常高值底物耗尽
连续监测法测定酶活性或代谢物浓度时．如果样品中的酶活性或代谢物浓度非常高．底物可被耗竭 ．在Reaction Monitor图的反应进程里发现严重偏离线性 在反应延迟期就可见到曲线的陡然下降或上升．在反应线性期由于底物的耗尽而出现无反应的直线，造成果假性低值或负数。这种情况应该引起大家高度重视．避免异常的结果漏报或错报 可以通过设置监测底物耗竭参数，仪器可以自动给出底物过度消耗的警告以提示。
上图6是速率法AST测定的反应曲线图。按操作说明测定点设置为15～21点．在ll～14点反应延迟期可见到曲线的呈陡坡式下降，困标本AST活性异常高底物被耗竭：在．15～2l点线性期反而出现无反应的直线现象．结果为47造成假性低值。这是样品中的酶活性或代谢物浓度异常高超出测定线性范围的假性结果，需将样品进行稀释后测定才能得到准确结果
2．4 反应测试无反应
上图7是速率法下降反应ALT的一个测定标本Reaction Monitor图，O～1O点为标本与试剂lf缓冲液)的反应过程．试剂空白OD值1．920，在10～1I点间加入试剂2．并搅拌棒混匀，React OD值下降，出现向下的“小坡”：在12～l5点延迟期和15～21点线性反应期出现无反应的直线．仪器报警显示符为“％”，提示样品探针堵塞。像这样由于样品量不足或其它原因引起的样品不足（如探针堵塞、样品中有气泡等）．试剂量不够、试剂瓶内有气泡、试剂探针堵塞等原因引起检测无反应，出现“％”、“R”、“#”等报警符时，反应曲线图能够非常直观地反应出这些情况
2．5 反应测定超出线性范围
线性范围是反应方法性能的重要指标．当被测物浓度或活性超出试剂设置的最大测定范围时．仪器可出现报警提示，并且可从反应曲线图上观察出上图8是终点法的一个标本RF测定的Reaction Monitor图，仪器出现“!”报警提示。0 10点问加入试剂1（缓冲液）和标本反应React OD值没有明显变化．所以0 10点间呈直线．在l0 l1点间加入试剂2和标本反应React OD值明显升高．并且仪器出现“!”报警提示。表明测定超出线性范围，需将标本稀释后重新测定．结果乘以稀释倍数。在运用终点法、速率法测定时，当仪器出现“@”、“!”、“z”、“B”、⋯F’、“D”、“ 等这些报警符表明测定超出线性范围，需将标本稀释后重新测定．结果乘以稀释倍数。
2．6 反应参数的设置
下图9是一个标本速率法LDH测定的Reaction Monitor图． 由于试剂1体积设置为1IOUL小于120UL（OLYM—PUS2700规定试剂1的设置应≥120UL)． 所以在Reaction
Monitor图上0～l0点间出现一段虚线 另外当波长设置不正确时反应曲线图可表现无出反应或低浓度反应的现象。
2．7 反应光源不稳或光电检测受影响
下图10因为光源不稳．一个批次所有项目的测定反应过程中都出现像锯齿样或波浪状的曲线．更换灯泡后反应正常。见图11。
另外．由于冲洗头堵塞或冲洗头软管老化等情况．造成比色杯溢水．光电检测受到影响．此时的反应曲线图也可出现波浪状的现象
参考文献
[1】徐国宾，蒋琳．自动生化分析仪测定参数的设置原则fJ1中华检验医学杂志，2007，10，30(10)：1 197～1200． ．
[2】罗侃，崔有宏．I临床化学方法学评价[M]．兰州：兰州大学出版社，1996，6．
【3]李萍，刘彬，兰英，等．生物化学检验【M】．北京：人民卫生出版社第五版．2003．
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