|
雅培AXSYM 免疫分析仪校标常见问题及解决方法
黄忠团 ，杨 琦。，曹春晓。，尹 红
(1．宜宾市第一医院检验科，四川宜宾 644000；2．宜宾市第二医院核医学科，四JII宜宾 644000)
中图分类号：R446 文献标志码：B 文章编号：1671—7414(2009)03—148—02
美国雅培AXSYM 化学发光仪是目前应用较为广泛的免疫分析仪之一，性能稳定可靠。其标准曲线校标方式分为Master Cal(主校标或称两点校标)和Standard Cal(标准校标或称六点校标)方式，校标比较容易通过。笔者一般会认为校标通过就意味着校标后的曲线是一条成功的好曲线，其实不然。如何判断校标曲线好坏及校标常见问题常被忽略或不被认识。笔者应用过程中的认识体会或许对同道有一些参考价值。
1 校标参数及含义 校标通过后，我们需要了解的Mas—ter Cal校标参数有Rate，AvgR，FitR，Rerr，RMSE，Master Cal 1(或2)ratio等；Standard Cal校标参数则没有ratio。Rate即速率值，也就是荧光读数值；AvgR即平均速率值；FitR是指与Reference Curve(参考曲线，即条形码上的曲线)相比较后得出的最适合的速率值，样本检测将根据FitR所拟合的曲线计算出相应结果；Rerr速率差，是指AvgR 与FitR 的差值；Master Cal 1(或2)ratio是指主校标的第一点、第二点与Reference Curve的相应点的速率比值；RMSE为相对均方差，是指Rerr的平方和的平均值，然后开方所得值。
以FSE身份登录，MAIN MENU(主菜单)一STORED RESULTS(结果保存)一CALIBRAT10N REVIEW (校标浏览)一选定项目一选定批号，便可以浏览到上述校标后的参数。继续选DETAILS(详细)，或按F6，则可浏览到标准品的具体速率值等情况。
2 浓度计算方法
2．1 正比曲线 所谓正比曲线即浓度C与Rate呈正比关系的标准曲线，雅培AXSYM 多数标准曲线为此类曲线，如FT4，AFP，LH，INS等等。其计算公式为Cx一(Ratex—FitRA)／(FitRs-FitRA)×Cs。Ratex为测定样本的速率值，FitRA为最适曲线A 点(零标准点)的速率值，FitRs、Cs为与Ratex最接近的标准点的速率值和浓度。
2．2 反比曲线反比曲线相对较少，如E ，FT3，Prog等，曲线采用四参数逻辑拟合法，计算公式较为复杂，精确计算比较麻烦。如自行计算时可采用近似计算法，误差在临床上还是可接受的，方法为Cx—FitRs×Cs／Ratex。
3 如何判断校标曲线好坏
3．1 先看校标后的AvgR，FitR与参考曲线的AvgR，FitR是否相差太大，一般来说相差越小表明曲线越好。
3．2 再看ratio和RMSE，理论上讲ratio越接近1越好；RMSE越接近于零越好。
3．3 最后就要看定值室内质控的结果了，这是很重要的依据。因为我们的仪器和参考曲线所采用的仪器性能上始终会有一定差距，所以前两项判断指标只能作为理论上的依
据，必须结合室内质控进行综合判断。这就对室内质控品提出了更高的要求，我们采用美国伯乐公司的室内质控品分装后冰冻，效果较好。
4 如何修正曲线
4．1 标准品变质是最常见原因，更换新的标准品重新校标。由于标准品在使用、保存等过程中都有可能使其浓度产生一定变化，更何况有些代理商采用分装方式出售的标准
品更容易变质，因此重新购买标准品是最好的办法。
4．2 Master Cal可采用自己制作标准点的办法。方法是首先确定Master Cal 2的Rate读数值大致范围，然后从近期检测过的样本中选择你想得的Rate值样本血清作为Mas—ter Cal 2，Master Cal 1用蒸馏水代替。如果没有刚好符合的样本血清咋办?选择较高浓度的样本血清进行初步稀释后上机检测，然后根据所测得Rate值和浓度值与参考曲线等对照再来修正稀释倍数，一般重复几次便可得到你想要的Master Cal 2。此方法用在Standard Cal中比较麻烦，毕竟确定多个点Rate值还是很困难的事，但进行某个点的修正还是可采用的。
5 校标失败原因及处理方法
5．1 标准品原因 虽然AXSYM 校标比较容易通过，但在标准品过于浓缩或稀释的情况下，仪器仍然会自动判断校标失败。如故障代码：1021(或1022)Calibration check
failure，CAL A—F，span too small(1arge)。校标检查没通过，标准点A～F跨度过小(或过大)。这种情况就是标准品存放过久或变质而过于稀释或浓缩，重新更换标准品即可。
5．2 试剂原因 雅培个别试剂不太稳定，如PRL到了夏季最容易出问题。故障代码：1048 Calibration check fail—ure，CALA／B，ratio too large。校标检查没通过，标准点A／B速率比过大。
这是因为PRL试剂不稳定使空白Rate增高造成的。
如果只是轻度升高，则采用Standard Cal就可以解决问题。
5．3 仪器性能下降仪器使用过久元件老化，加之平时维护保养又未跟上，仪器性能会大大降低，比如光源灯亮度衰减过度、检测计数透镜表面积尘、光电管老化等。如故障代码：1O14 Master Calibration failure，M —CAL 1，Curve devi—ation。主校标失败，校标点1，曲线偏离。1076 Calibration failure，Calibrators incorrectly loaded。主校标失败，校准点不正确。1儿Calibration check failure，M—CAL 1，response tOO large。校标点1反应值过大，主校标失败。
以上主要是光源灯亮度衰减过度、或光电管老化等机器性能下降造成。当然试剂和标准品的原因也可能存在，如何区分呢?一个校标点和多个校标点的区别；个别项目和多
个项目，偶尔和经常的区别。
1072 Invalid test result，net intensity tOO low．* * * *．****因读数孔透镜积尘，造成本底读数过高，有效荧光强度过低，使检测结果无效。
上述问题处理措施包括：光路定标、更换光源灯、更换老化部件、采用Standard Cal、清洁除尘等。也可请雅培工程师代劳。
5．4 其它原因如系统软件缺陷造成校标不能正常完成等故障代码：1060 Calibration failure，incomplete calibrator results．校标点部分未完成检测，而致校标失败。
这种情况可见于在已做较多项目的情况下校标，因系统软件缺陷或其它原因使个别校准点未完成读数检测而导致校标失败，特别是重复校标更容易出现。处理方法是等其它项目都完成后再专门校标。
| 
