——胡丽涛、王治国
[摘要]目的 阐述尿液分析操作和质量保证。
方法 主要参考美国临床和实验室标准化研究院（CLSI）GP16-A3文件相关内容，并结合具体的实际进行总结。
结果 尿液标本的质量是影响检验结果的重要因素，应该按照操作规程采集正确类型的尿液标本并适当运送和保存。尿液分析包括物理、化学和显微镜检查。 物理性质可根据临床要求和实验室规定进行选择性报告；化学检验应保证试纸条的合格有效，结果判读的标准化；显微镜检查应对尿沉渣颗粒进行准确识别和分类。
结论 尿液分析是临床检验的基本组成部分，在实际工作中要严格按照操作规程和厂家说明，保证结果的准确可靠，为临床提供诊疗依据。
[关键词] 尿液分析； 尿沉渣； 管型；试纸条
尿液分析简单快速，是临床检验的基本组成部分。尿液分析可用于诊断肾脏、泌尿系统和肝脏疾病，监测慢性病的疗效和筛查无症状患者。及时准确的尿液结果对临床的意义重大。
1. 尿液标本准备
1.1尿液标本采集方式
根据尿液标本是否需要专业人员的监督和辅助可将尿液标本采集方式分成3种情况：患者采集、监督下标本采集和辅助采集。患者采集，患者按照说明自己采集随机尿，晨尿和计时尿包括24小时标本。中段尿，用于微生物培养和法医案件标本的采集需要有经训练的实验室工作人员的监督或参与下采集。采集导管尿、耻骨上穿刺尿和婴儿标本需要专业人员的参与辅助采集。
1.2指导患者采集标本
除了导管尿和耻骨上穿刺尿的采集外，其它的尿液标本都是在患者自愿排尿的情况下采集，并且尽可能避免阴道分泌物、阴蒂诟或阴茎垢、阴毛、粉末、油、洗液和其它外来物质的影响，也不能采集尿布上的标本。
合作的患者可以在实验室工作人员的指导下采集多种尿液标本，工作人员的指导内容如下：强调洗手和一般的清洁；给患者带有标签的容器，并且核实标签上的姓名；给患者口头指导和书面说明，将更多的信息贴在尿液标本采集的地方；用患者的母语对患者进行指导；告诉患者盖上标本采集的容器盖子，以免漏掉。
1.3成人和大龄儿童标本采集
实现进入系统计算机化，记录采集的尿液标本类型、日期和时间。申请单的设计应留下空间记录以下信息：标本采集的实际日期和时间，标本采集的信息（导管尿、清洁尿、晨尿），标本运送前是否经过冷藏（冻），申请时间和实验室收到标本、检测标本的时间。此外，还应有相应区域用于注明可能影响分析结果的任何特殊情况，如服药（阿司匹林、维生素或抗生素），可能存在月经血污染，剧烈运动和任何相关的临床信息。
随机尿可在任何时间采集，但是应该将采集的实际时间记录在标本容器上。为提供合适的标本有必要在采集标本前进行数小时的憋尿。晨尿标本一般在患者清晨起床后立即收集，也称作过夜标本、8小时标本或者清晨标本。计时尿（timed collection urine）指采集规定时段内的尿液标本，如上午10点或者在一项活动后的规定时间（如进餐后2小时或者前列腺按摩后）。如果要测量24小时内的尿液总量，则需要严格采集24小时尿液标本，因为很多溶质可能在一天内又变化。儿茶酚胺、17-羟皮质类固醇和电解质在清晨的浓度最低，在中午或者之后较短时间内浓度最高。导管尿是将导管经尿道插入膀胱后用无菌技术收集的尿液标本。从导管流出的尿液可被看作是单个标本。耻骨上穿刺尿是通过无菌技术经腹壁穿刺膨胀膀胱采集到的尿液标本。上述尿液标本若按规定采集则都可用于微生物培养。对病人进行适当的指导可以减少尿液培养的污染。
清洁尿。男性患者按以下步骤采集：1）首先患者应用肥皂或者清洁湿巾洗手；2）推开包皮，裸露尿道口；3）用无菌湿巾或其它材料从尿道口开始清洁龟头；4）弃去前、后段的尿液，将中段尿液收集在适当的清洁容器中，将过多的尿液倒入便盆或厕所；5）若患者不能完成上述步骤则要辅助其完成，辅助过程中要戴无菌手套。女性患者按以下步骤采集：1）首先患者应用肥皂或者清洁湿巾洗手；2）蹲在便盆上或厕所；3）用无菌湿巾或其它材料清洁尿道口和周围皮肤；4）弃去前、后段的尿液，将中段尿液收集在适当的清洁容器中，将过多的尿液倒入便盆或厕所；5）若患者不能完成上述步骤则要辅助其完成，辅助过程中要戴无菌手套。
1.4婴儿和小儿标本采集
使用具有低过敏性粘合剂的儿科或者新生儿尿液收集袋采集婴儿或者小儿的尿液标本。
1.4.1随机尿标本
采集小儿随机尿时，临床工作人员应该按照以下步骤:1）分开小儿的双腿；2）使小儿的尿道口及周围的皮肤清洁、干燥、无粘液，不要对皮肤使用粉、油或者洗液；3）使用儿科尿液收集袋，去掉保护纸片，暴露袋子上的低过敏性皮肤粘附剂；女性，展开会阴的皮肤，将粘附剂紧贴在外生殖器周围的皮肤处，避免肛门部的污染；男性，将袋子套入阴茎，将粘附剂紧贴在阴部；5）确保尿液收集袋的粘附剂部分紧贴皮肤，且没有起皱；4）定期检查尿液收集袋（如每15分钟）；5）取下尿液收集袋并贴上标签；6）将尿液标本带入尿杯中，避免污染。在尿杯上贴上标签。有些医院使用棉-羊毛球而不是粘附带。这种情况下，显微镜检时应该注意外源性纤维污染的可能。
1.4.2用于微生物培养的标本
采集用于微生物培养的小儿标本，临床工作人员应该按照以下步骤：1）首先用肥皂或清洁湿巾洗手；2）分开小儿的双腿；3）使小儿的尿道口及周围的皮肤清洁、干燥、无粘液。不要对皮肤使用粉、油或者洗液；4）使用儿科尿液收集袋，去掉保护纸片，暴露袋子上的低过敏性皮肤粘附剂。女性，展开会阴的皮肤。将粘附剂紧贴在外生殖器周围的皮肤处。避免肛门部的污染。男性，将袋子套入阴茎，将粘附剂紧贴在阴部。确保尿液收集袋的粘附剂部分紧贴皮肤，且没有起皱；5）定期检查尿液收集袋（如每15分钟）；6）取下尿液收集袋并贴上标签；7）将尿液标本带入尿杯中，避免污染。在尿杯上贴上标签。
1.5标本采集容器
标本采集和运输的主要容器应该清洁、防漏、无颗粒并由清洁、可处理且与尿液成分不反应的惰性材料组成。容器应该没有干扰物质（如洗涤剂）。大多数实验室对所有尿液标本都使用无菌容器。不能重复使用尿液采集容器。主要的尿液标本采集容器应至少要有50mL的容量，开放直径在4cm以上。容器底部要足够宽以防止意外逸出。较小的特殊容器用于小儿的标本采集。用于微生物学研究的容器应保持密封。在尿液分析之前进行微生物学研究，或者用无菌操作从尿液分析标本中取出部分标本用于微生物学研究。若标本采集与分析间的时间间隔超过2个小时，建议使用无菌容器。
标本采集容器的标签应在冷藏或冰冻的情况下也不会脱落。标签应有足够的空间标明患者的名字、唯一的编号、标本采集日期和时间以及使用的防腐剂。有的实验室的标签还包括条形码信息。标签应贴在容器上，而不是密封盖上。若标本从采集到分析的时间超过了2个小时，则尿液标本的保存需要用到冷藏、冷冻（不适合用于显微镜检查）、特定的化学防腐剂或者中间运送装置。
1.6标本运输和储存
1.6.1标本运输
标本运输的容器密封，以免标本漏出。如果合适，可采用第二个容器以避免溢出。将标本快速运输至实验室并快速检验。实验室应确保标本在运送过程中的完整性（如气动管道系统）。防腐剂的使用不能超过厂家的声明。
1.6.2保存
如果标本不能马上运输和分析，应该将采集后的标本保存在冰箱中（2~8℃）。冷藏可降低尿液培养的污染率。如果需要进行微生物检验，但标本不能马上运输到实验室，则按照以下步骤：首先将标本保存在2~8℃冰箱中，然后将尿液转移至含有抑菌防腐剂的运送试管中，咨询实验室此标本所作的检验是否有特殊运送要求。加入了防腐剂的标本不需放入冰箱冷藏。如果运输时间较长，将琼脂薄膜（固定在塑料支撑物上）浸入标本中，取出后放置在适当的密闭容器中。尿液标本和琼脂都运送到实验室，琼脂薄膜可用于亚培养。适当保存标本，仔细监测和记录所用试剂及其保质期，减少使用过期试剂的可能性。监测库存试剂是一项重要的质量保证活动。
1.7标本的可接受性和质量保证
1.7.1标本信息
尿标本检验申请单的信息应包括：患者姓名、年龄、出生日期、性别、门诊或住院病人、编号、标本类型（如导管尿、中段尿、清洁尿或其他）、申请医师、申请单填写人、诊断或主要症状、可能造成干扰的处方和非处方药物（包括饮食添加剂如维生素C）、标本采集时间和日期、所用防腐剂和实验室接收标本的时间。
1.7.2检查
为了确保标本合格，实验室接收标本时应检查以下几点：核实申请单和容器标签上的信息是否一致；标本采集到实验室接收的时间间隔是否可接受；如果用于微生物检验的标本运送延迟，要检查其冷藏或者使用防腐剂的情况是否合理；所用容器及其它相关条件是否恰当；标本量合适并且没有其它物质的污染；是否存在与标本预期使用目的一致的化学防腐剂。
1.7.3可接受性
进行显微镜检的实验室应该有标本质量标准。存在生殖器或肛门污染的一般镜下指示（如大量成熟鳞状细胞，线索细胞、蔬菜纤维），在这些存在污染的情况下，细菌不能表明泌尿道感染。如果标本不能满足可接受的标准，与临床医生联系，采取相应的措施。在联系临床医生并达成一致协议前不要将“不合格的”标本弃去。
1.7.4文件材料
建立一个质量保证计划确保记录以下信息。标本采集信息：标本类型、体积、所用容器和标签适当。标本运送及时，与推荐规程一致。标本到达实验室后迅速检查和准确保存（如避光、热和冷藏）。
2.检验材料和设备
将容器、试管和玻片贴上标签以正确标记标本信息。所有用于尿液分析的材料都应该是没有颗粒的材料。
2.1离心试管
适用于尿液分析的离心试管具有以下特征：为适用于尿液显微镜检查的清洁塑料或玻璃材质的试管，且在离心过程中不会被破坏；离心试管有多种容积，以便保证尿液体积标准化；密封以减少溢出和离心气溶胶的危害；如要进行人工显微镜镜检，则离心管的底部应该成圆锥形；没有化学物质干扰；有适当的标识标签。不推荐重复使用离心管。
2.2转移移液管
推荐使用一次性转移移液管以减少与加入悬浮液和转移沉淀物相关的生物危害。转移移液管应该清洁并且没有颗粒。
2.3显微镜玻片、检查装置
适合使用商业的、一次性的标准显微镜玻片或者具有刻度的分室观察装置。不推荐使用平面玻璃载玻片和盖玻片，因为其不能产生标准的、可重复的结果。从针刺的安全角度考虑，具有完整分室的塑料玻片更合适，但是它们不能用于偏振显微镜。不推荐重复使用玻片。
2.4试纸条
试纸条是用塑料做支撑，其上有一个或多个化学检测位点，这些位点也被称作“干试剂化学反应位点”。尽管试纸条没有明显的变化，根据规定过期的试纸条也不能使用。试剂的保存应该遵守一定的保存注意事项以保持试剂的活性。为了获得较好的检测结果，有必要做以下工作：1）根据厂家的推荐，将试纸条保存在出厂时的容器中，直接暴露在光线或者潮湿的房间里可能影响试剂检测条从而产生错误结果；2）保持容器密封，保存温度为厂家推荐温度；3）每次取出少量的试纸条，迅速将容器闭紧，不要将试纸条重新放回容器中；4）避免混合不同容器的试纸条；5）避免接触试纸条上的化学物质。
2.5防腐剂与标本保存
在新鲜标本采集后2个小时内检测标本。如果检测延迟，对于一些化学成分可用冷藏的方法保存（除胆红素和胆素原），但是可能沉淀非结晶尿酸盐或磷酸，这些物质会模糊显微镜的视野。对于多种分析物，混合充分的尿液应该根据使用目的来不同对待。以防腐为目的的冷藏时间没有一致的规定，因为其取决于个人尿液的组成。光敏感的成分应该避光（如胆红素）。
如果使用购买的尿液防腐系统，首先实验室要对其评估。防腐剂的使用要满足尿液标本可被非冰冻运送。防腐剂的使用参考试剂或仪器厂家的推荐。
2.6显微镜
现代化、高质量的亮视野显微镜应具有以下特征：具有双目镜头可供两只眼睛观察玻片；内置光源；具有机械载物台使玻片简单顺利放置；基本放大倍数的物镜（如10倍和40倍）和目镜（如0倍或12.5倍），在低倍镜下有较宽的视野观察整个玻片；油镜（如50倍和100倍）用于细节观察。如果使用一台以上的显微镜，应使用相同的物镜和目镜检查晶体和外来物使用偏振滤片。
2.7尿比重仪
折射计通过测量液体中总的溶解物质估计溶液的比重（Specific Gravity，SG）。
2.8离心机
用于尿沉淀制备的离心机应具有以下特征：当离心机在运转的时候自动锁定盖子，运行的环境温度为15~25℃。
2.9记录
所有仪器都应该遵守以下规定：在工作台上应该有电子的或者纸质的操作规程（可能部分来自厂家提供的操作说明），要有记录的维护和功能验证计划，服务和维修记录和工作台应该有厂家的说明手册。
2.10质量控制
遵守所有用于实际工作的规定和厂家的说明。
2.10.1化学分析
推荐使用多成分的阳性和阴性质控物质确认每一项化学检测。阳性质控物质应该设计出产生弱阳性结果，质控物质反应出检测系统的早期改变。质控物质的检测频率由实验室根据工作量、厂家建议和相关规定来确定。例如，实验室一瓶试纸条在一个月以上用完，则选择每周进行质控；若实验室每天要用数瓶试纸条，则每一瓶试纸条做一次质控。
一般使用商品质控物。此外，同一患者的已测标本可分装成数份并分析，通过与原始结果进行对比来做精密度检查。质控物质分析所得的值应该在实验室制定的界限范围内。推荐参加外部尿液分析质量评价来评估尿液化学分析的性能。
2.10.2显微镜检查
商品质控物质不能获得所有的尿液沉淀成分。新鲜患者标本的重复检测可以建立显微镜分析的室内和室间重复性。对于任何项目，结果的一致性必须再±一个报告范围。如果显微镜检查在成分的有无或者数量方面不一致，则需要重复检查。有必要的话可以请有经验的主管或者主任解决不一致的问题。每个实验室都应该建立异常沉淀检查结果审核的制度。可参考教科书、图集、表格和海报是有用的培训指导，也包括检测的实际条款。从能力验证获得的图集是很有用的资源。
3.物理性质检验
3.1标本可接受性
由于尿液分析结果的真实度取决于标本的质量，因此要注意适当的采集和运送尿液标本。
尽管化学分析可用随机尿，但是更适合用未经离心的、充分混匀的、温度在15~25℃的晨尿，标本在采集后2小时内要进行检测。晨尿是最浓缩的尿液，沉淀成分可得到最大量的回收。
尿液标本采集后应迅速运送到实验室并尽可能马上进行检测。一般，室温条件下2小时后尿液的化学成分会发生变化，有形成分也开始破坏。尿液成分如胆红素和尿胆原不稳定。细菌会改变葡萄糖的浓度和pH值。在低比重（SG<1.010）和碱性尿液标本（pH>7.0）尿液中结晶、红细胞和白细胞特别容易被破坏。
如果标本不能在采集后2小时内检测，则要将标本冷藏（2~8℃）。在分析前将标本放置在室温下。如果标本不能马上检测则要记录延迟和相关的温度。用于肉眼检验和显微镜检查的最少尿液的量为12mL(最好是50mL)，但是也因采集容器而异。婴儿标本需要的最少标本量要小。将尿液标本收集在清洁、防漏的一次性容器中。标本应该没有大便污染和不含纸巾物质或其他外来物质。如果达不到这些标准，则应该通知申请的临床医生标本不合格，需要重新采集标本。
3.2颜色、可见度和气味
尿液标本的颜色、可见度和气味很少有临床意义。询问临床医生尿液标本的物理检查是否要为常规分析的一部分。但是，任何不正常的颜色、可见度或者气味应该在报告中注明。氨的气味通常是由于尿素的细菌降解，它表明标本陈旧或者泌尿道感染。实验室应建立标准的方法和术语减少模糊不清的情况，客观报告标本的颜色、可见度和气味。颜色过深的尿液标本可能干扰试纸条反应后的颜色。
3.3尿浓度（比重）
尿比重和渗透压是尿液浓度测量的两个最主要的指标。临床上，尿渗透压是尿浓度评价最准确的指标，SG检测的操作简便，特别是床旁检测。尿SG是尿液标本的重量与等体积在等温度下稀释水溶液重量的比值。这个比值用数字值表示：对于人体尿液，正常的SG值为1.003~1.035。尿素（20%）、氯化钠（25%）、硫酸盐和磷酸盐是尿SG的主要贡献成分。实验室测定SG通常使用的方法是使用数学关系或经验关系估计SG值的间接方法。有的实验室使用渗透压代替SG。
测量SG经常使用折射计。这种方法的原理是光的折射率与溶液中总的溶质的量成比例。用于尿液分析的折射计的刻度应该经过校准。由于折射计的温度补偿范围为5~38℃且需要的尿液量相对较少，因此折射计的使用很普遍。当标本中含有X光造影剂、血浆扩张器和大量葡萄糖或蛋白质时，可能使结果偏高。由于大量葡萄糖和蛋白质可增加标本的密度，因此应该对折射计测量所得结果进行校正。1克每分升的蛋白质或葡萄糖可使SG的值分别增加0.003或0.004，当标本中含有X线造影剂或者血浆扩张剂时通常使用渗透压或试纸条，因为渗透压和试纸条不受这种高分子量物质的影响。
谐振荡也可用于测定SG。测量谐振荡的偏移可以计算相对密度。该测量方法的原理是基于声速与密度的状态属性关系。这种仪器的优点是自动化操作，结果与折射计结果相关性很好，且无需澄清浑浊标本。仪器测得的尿液标本中溶解的物质与重力测量所得结果紧密相关。
比色试纸条也可用于测量SG。试纸条的原理是标本中的离子数量与高分子电解质聚合物 (Polyelectrlyte-Polymethylvinyl ether/maleic acid)pKa的改变存在函数关系。试纸条测量SG的范围为1.000~1.030，增量为0.005,。碱性尿液可影响指示剂系统，人工判读试纸结果时应在原结果的基础上增加0.005。试纸判读仪器可自动调整结果，此类仪器的优点是自动化操作，与重力测量结果高度相关，无需校准葡萄糖或蛋白质的影响，也无需澄清浑浊标本。
最先的测量SG的方法是液体比重测定法。液体比重测量仪使用液体移动估计SG。经校准的测量尿液标本SG的液体比重测量仪称为尿比重计。尿比重计的缺点是所需的标本量较多（10~15mL），玻璃材质容易扎手。尿比重计使用时需将其放入装有标本的容器中，容器要足够宽，以避免比重计碰到容器壁。温度会影响比重计结果的阅读，因此需要对测得的值进行校正；弯液面处的结果判读困难；尿比重计购买后要进行校准否则结果可能不准确。因此，尿比重计不是SG测量的好方法。
上述方法都可能受到标本中分子数量及离子所带电荷数量的影响，大分子物质比小分子钠离子和氯离子的影响更大。非试纸条的SG检测方法的质量保证活动应该包括每天的质量控制。按照厂家推荐的质量保证方法。遵守政府的规定和当地科学的或临床的推荐。正如颜色、可见度和气味等物理项目，实验室应该确定报告SG是否有用、何时有用。
4.化学分析 — 手工法
尿液标本的化学分析使用的是试纸条。试纸条是含有一种或多种化学反应区的塑料条。当化学反应区域与尿液接触时产生显色反应。尿液试纸条是一种简单快速的半定量尿液检验方法。试纸条的化学反应区一般包括：酮体（乙酰乙酸和/或丙酮）、白蛋白、葡萄糖、白血胞酯酶、亚硝酸盐、血红蛋白、胆红素、pH、尿胆原和SG。
有的实验室将试纸条切成数段供多个患者使用以减少成本。CLSI没有鼓励也没有认同这种方法，因为由于技术上的原因患者结果可能不准确。按照厂家的说明，如对产品的使用和改变直接询问厂家。
4.1试纸条的使用
培训工作人员如何使用试纸条。不同厂家的试纸条或者同一厂家不同批次的试纸条不能互换。不同试纸条检测的操作程序也可能不同，参照厂家的说明。检查不同批次试纸条操作说明是否有更改。
每条试纸条显色反应需要的时间不同。按照厂家的说明叮咛判读结果的时间。肉眼判读结果需要带有秒针的计时器。若机器判读结果，应按照厂家的说明设定判读结果的时间。知道所用试纸条的敏感度和特异度非常重要。通常产品中附带有这方面的信息，但是实验室应该进行验证研究。
肉眼判读结果在一定程度上因个人对颜色变化的不同理解而不同。判读结果时应在适当的光线下将试纸条靠近比色卡。应该对检测人员进行颜色判读检查以保证正确判断颜色的改变。
尿液中有些物质可干扰化学反应，造成假阴性或假阳性结果。厂家的说明中附有相关信息。如果试纸条的结果与期望值不同，根据厂家说明或实验室操作手册查找原因。
4.2确认试验
确认试验是用具有相同或更高敏感性或特异性的试验检测相同的物质，或使用不同的反应或方法学检测此物质。用试纸条进行重复检测和分析不是确认试验。以前的很多尿液分析确认试验如磺基水杨酸法检测蛋白质、试纸片检测酮体和试纸片检测胆红素不包括在现有水平的检测方法中。
除化学分析物外，手工和自动化的显微镜尿液分析系统为血细胞、白细胞酯酶和亚硝酸盐的检测提供了确认试验。当试纸条提示白细胞酯酶和亚硝酸盐阳性，显微镜提示有细菌和白细胞，微生物学检测是泌尿道感染的确认试验。通常传统的尿液细胞学和细胞学诊断尿液分析可作为显微镜尿液分析的确认试验，提示炎症、感染和肿瘤状态。福尔跟染色的成像细胞技术和DNA分析是新的核酸分子技术，作为泌尿道上皮肿瘤的确认染色有一定的价值。
5.显微镜分析 — 手工法
很多文献强调了尿沉渣显微镜检查的重要性。除试纸条检测白细胞酯酶和亚硝酸盐外，也提出了尿标本正常理化结果显微镜检查成本效益的问题。各实验室应该在各自患者人群的基础上确定何时进行显微镜检查。一般在以下情况下进行显微镜检查：医生申请，实验室规定（如免疫抑制性、肾病、糖尿病患者或者孕妇），理化结果异常。
5.1手工镜检
多数尿沉渣检查都是使用湿片和明视野显微镜。在某些情况下，染色可以帮助鉴别细胞和结晶。一般的体外活体染色适合于湿片，包括斯-马二氏染色剂（结晶紫和红色染液O）和0.5%的甲苯胺蓝。参照厂家说明或具体染色程序的说明。
尿沉渣检查使用经库勒照明系统调整的现代化高质量显微镜。相差显微镜可以提高尿沉淀的成分的鉴定能力。对于异常沉淀，推荐使用偏振显微镜鉴定脂质和晶体。微分干扰相衬纤维技术对于选择性使用较为有用。
显微镜检查的所有结果的一致性对于产生有意义结果十分必要。适当的编写和修改操作规程确保所有检验人员用相同的方法进行显微镜镜检。每个工作人员都应该用相同的程序评价沉淀物，检查相同的沉淀物质是否存在，使用相同的标准进行鉴定。实验室可用标准化的商业系统。商业系统以单位体积异常沉淀成分的方式报告结果、取代了不使用高倍镜下或低倍镜下视野的报告方式，适合于不同实验室间的比较。
实验室室内应该标准化的因素如下所述。商业系统技术用于人工显微镜检查可提供等同的结果。这些技术使用的表白体积更少，具有不同的标准时间和速度。具体的系统应该按照厂家的推荐进行操作。
5.2离心与重悬
实验室应该统一用于检验的尿液标本的体积（如8、10、12和15mL）。如果使用的标本体积小于规定的体积，应该在最后的报告单上注明。为保证所有标本同样沉淀，推荐的离心时间为5分钟,推荐的离心速度约为400g。用每分钟的转速（RPM）计算RCF的公式如下：RCF=1.118X10-5 ×r × N2 。其中r为半径（cm，中心轴到试管底部的距离），N为每分钟的转数。不同的患者标本或者统一患者的系列标本都使用统一体积的溶液重悬沉淀。标准化的商业系统使用特殊的试管或微量吸管使尿液沉淀保持特定的体积。标准化的商业系统提供了带有一定体积内室的玻片，能够装特定量得浓缩沉淀。
5.3载玻片和盖玻片
如果使用玻璃材质的载玻片和盖玻片，推荐使用以下操作规程检验和计算尿沉渣：1）测量用于离心的充分混匀的尿液体积;2）标准化离心（时间和速度）;3）测量试管中剩余尿液的体积，重悬剩余尿液中的沉淀;4）测量置于载玻片上沉淀的量，使用标准的载玻片;5）记录显微镜高倍镜下的放大倍数;6）记录高倍镜下视野的直径;7）计算和报告每毫升尿液的成分。例如，用15mL尿液，高倍镜下视野的直径为0.35mm，高倍镜下视野的面积为0.096 ，盖玻片下的面积为484 ，盖玻片下的高倍镜视野个数为484/0.096=5040个，载玻片上0.020mL沉淀约为1.2mL尿液，5040的高倍镜视野≈1.2mL尿液≈4000个高倍镜下视野/mL。因此（计数/高倍镜视野个数）×4000=计数/mL。
5.4结果报告
同一实验室的检验工作人员应该使用相同的术语、报告形式和参考区间。有的尿沉渣结果没有临床用途，因此哪些结果应该报告和定量由各实验室主任决定。在报告显微镜检查结果之前有必要审查所有信息，包括理化检查结果。这些报告单的数据应该证实显微镜检查的结果，反之亦然。结果间的差异应该在结果报告之前解决。
5.5可识别的沉淀物质（有形成分）
以下物质可用显微镜检查进行识别。上皮细胞：鳞状上皮细胞、肾小管上皮细胞和移行上皮细胞；血细胞：红细胞（RBC）和白细胞（WBC）；管型：细菌管型、宽大管型、细胞管型、脂肪管型、颗粒管型、透明管型、红细胞管型、蜡样管型和白细胞管型；微生物：细菌、寄生虫、病毒包涵体和酵母菌；结晶：无固定形状结晶、草酸钙结晶、胆固醇结晶、胱氨酸结晶、磷酸盐结晶和尿酸结晶；其他：污垢物、粘液线和精子。尿沉渣其他成分的识别需要更先进的显微镜技术。
5.6染色
体外染色对于所有尿沉渣物质的鉴定和确认是不够的。实验室可用完全的湿片显微镜尿液分析经一种或多种特殊染色鉴定或确认以下物质：脂肪：油红O染色、苏丹III；椭圆脂肪小体：同脂肪；细菌：革兰染色、巴氏染色；嗜酸性物质：汉斯染色、瑞氏染色、姬姆萨染色、瑞氏-吉姆萨染色和巴氏染色；含铁血黄素：普鲁士蓝染色。
通常使用特殊染色需要另外制备。浓缩涂片，印片或离心后的切片有助于鉴定这些物质。
巴氏染色可用于肾小管上皮细胞和异常的尿道上皮、腺上皮和鳞状上皮细胞；造血情况的染色。汉斯染色用于检测嗜酸性粒细胞尿。
5.7显微镜检查质量保证
使用同一仪器的操作人员都应该遵守相同的文件化程序。每天都应该进行显微镜质量控制。含有白细胞和红细胞的质控物可以通过购买获得。双份尿液检测可用于管型、肾小管上皮细胞和其他有形成分识别的精密度检查。
所有工作人员都应该使用相同的术语、以标准样式报告结果。应该识别出未预料的控制结果，采取适当的纠正措施并进行文件记录。
6.自动尿液分析仪
自动的尿液分析系统给用户带来了最大的便捷，提高了工作效率，省去了标本准备。半自动尿液分析仪可进行显微镜检查、试纸化学检验和SG测量。这类仪器可以进行标准化的定量尿液分析。水动力的无切片层流 显微镜通过一个视频系统和高速成像处理系统进行检测。系统将有形成分自动分类，经合格的操作者进行确认，这样可以提高检测的敏感度和可重复性，方便使用。与手工显微镜镜检相比，其主要的优点是大量的尿沉渣成分可以实际计算。
还有其他的尿液分析仪将标本离心入试管中，试管可直接用于显微镜观察。这些仪器可以简化标本的制备、减少所需标本的量。尽管这些仪器使用不同的方法学，但它们都是对标本进行筛查并减少切片、离心试管的使用，减少标本的处理。尿化学和SG检测也有半自动和全自动的试纸条结果判定仪。
6.1自动化检验方法
按照厂家提供的指南进行分析前准备，包括适当的混匀、标本温度、仪器启动、校准、质量控制、患者标识标签和仪器处理。操作者必须检测系统和厂家的性能说明。实验室应该验证仪器的性能，如准确度、精密度、分析灵敏度、分析特异度（包括干扰物质）和分析测量范围。此外，任何特殊处理都应该按照厂家的说明。使用自动化仪器最关键的问题是确保仪器结果可靠，即使是在低浓度条件下。
自动分析仪的质量控制可使操作者自信仪器在规定范围内正常运作。质控标本必须和常规患者标本用同样的方式检测，并与患者标本使用相同的液体通路。适当的质控测量包括液体系统和分析过程所需添加液体（如稀释液，不用于主要仪器的常规使用）的本底核查。除非是厂家规定的质控物质，其他常规使用的质控物质应该通过当地认可机构或监管机构验证。
6.2尿液化学分析仪
尿液干化学结果可以通过试剂块显色反应颜色的变化和强度不同来检测。但是可用仪器客观的测量这些反应的强度并且避免反应时间的差异和颜色的判读。半自动和全自动尿液分析方法为实验室提供了一种减少结果不精密度的途径。这些仪器去除操作者判读试纸条颜色改变的主观差异。尿化学试纸条判读仪有各种不同的类型，有简单的一次读取一条试纸结果的“蘸取-判读”式仪器，也有一次可处理多条试纸条的仪器。用这些半自动仪器进行检测，操作人员是否需要测定标本的颜色和可见度取决于仪器的类型和实验室对于是否常规报告物理性质的规定。
半自动和全自动仪器的原理都是利用百分反射率确定被测量的浓度。当存在特殊被测量其浓度等于或高于检测浓度，则会发生化学反应并且产生颜色变化，颜色的变化与浓度成比例。在规定的时间间隔光以特定的波长传播，波长取决于被测量的浓度、吸收的光和反射剩余的光。反射光被特定波长的感受器捕获，自动计算被测量浓度。全自动仪器与半自动仪器相比，其优点在于自动混匀标本，将标本转移至化学试纸条，确定标本颜色和可见度，通过折射仪确定SG。这种仪器不用手工操作，检测的效率远远高于半自动仪器。全自动分析仪可以独立模式工作也可以连接到一台半自动或全自动的尿液显微分析仪，提供完整的尿液分析结果（如将尿液化学分析仪与显微镜结合）。仪器所用的化学方法可参见厂家的说明。
厂家已经将很多质量保证要求整合到了系统中（如计时、校准和错误代码），使用这种仪器时应按照以下规定：阅读并遵守操作规手册，建立并实行维护计划，保持仪器清洁，立即处理任何溢出标本或试剂。这样也可以帮助避免交叉污染。
6.3尿液颗粒分析仪
手工显微镜检查的另一种方法是用自动或半自动仪器进行尿沉渣分析。这类仪器不需要手工制备样本，能够对细胞和其他有形成分进行分类。与不同工作人员进行手工显微镜检查相比自动或半自动系统提高了检测的再现性，但是它用于高肾脏疾病患病率的人群时存在一些局限。
自动化尿液分析仪使用不同的技术对尿液中的颗粒进行分类和计数，所用的技术包括电阻抗、数字成像、流式细胞术、光散射、染色、荧光和合成，对具有相似性质的颗粒进行分组和分类。自动尿沉渣分析仪所分析的尿液成分一般包括红细胞、白细胞、上皮细胞（鳞状上皮和非鳞状上皮）、管型（正常管型和病理管型）、细菌、精子、粘膜和小圆上皮细胞。若出现实验室规定的或仪器提示的异常情况，则由技术人员进行显微镜检查。无异常提示的标本可省略手工镜检。
7.质量保证
质量保证活动是对检验程序的每一个方面都进行持续监测从而尽最大可能使患者的诊治得到保证。质量保证活动应该建立起所有参与者包括患者、实验室和临床医生的交流合作。检测质控物或者质量控制仅仅是质量保证的一个方面，还包括对标本采集和处理、保持记录、技术能力、标准化、继续教育和审查过程的实施和监管。
7.1 保持记录
保持记录是实验室质量保证的一个重要部分。所有变化都应该有记录，包括质控和仪器审查。对检查和纠正错误、失控结果和检测结果审核的操作过程应该有书面规定。患者结果的报告应该附有参考区间。按照管理和认可机构的规定保存患者结果。
工作台上应该有电子的或书面的记录，其内容应该包括：试纸条的批号和过期时间，所有的患者结果和质控结果，标本采集和达到实验室的日期和时间以及执行操作的检验人员的身份识别。
7.2操作程序手册
检测工作台上应该有操作规程手册。完整的尿液分析操作程序手册是对检测的说明指导，应包括以下信息：标本接受和拒收标准（如标本采集后的时间、所用防腐剂和最低质量要求）、质量控制、参考区间、危急值、交流协议、确认检测、标本采集和运输及结果记录。
7.3能力验证（室间质量评价）
外部能力验证活动是由厂家、专业人员、医疗机构和一些公共卫生实验室发起的，通过与同行或已知被测量比较检查检测的真实度。每年向每个实验室分发数次标本，记录上报结果并将参与实验室与其他实验室的性能比较结果发送给各参与实验室。
用于显微镜检查的自配或商品质控物质只用于精密度的检查。一些能力调查中的片子是用于评价技术人员正确鉴别显微镜下成分的能力，不能评价尿沉渣和标本切片制备、有形成分定位的重现性。
7.4工作人员能力
应该发动和支持与尿液分析有关的讲座、研讨会和自我学习等继续教育活动。技术人员应该更新知识和技能。实验室应该配有最新的参考教材、图集、图标和海报。只有经过合格培训的工作人员才能完成尿液显微镜检查。缺乏这种专业知识，实验室只能用试纸条提供半定量信息如血尿、脓尿和菌尿。
形态学者的工作能力包括对单个尿沉渣标本鉴定，所得结果与预期分类结果比较作为真实度测量。至少用50张显微镜图片评价工作人员正确识别尿沉渣内所见物质。这些显微镜图片可来自教学收集、从厂家购买或者能力验证计划标本。为了确保分类的客观性，要选择大量观察者的检查结果一致性较高的标本。这些标本可从能力验证活动中获得，应包括正常和异常标本。此外，还应该建立合格的标准（通常80%~90%正确识别率）。
现有的能力验证评价的途径有参加能力调查、与其他显微镜工作人员的镜检结果比较或基于网络的评价系统。
参 考 文 献
[1]CLSI. Urinalysis; Approved Guideline—Third Edition. CLSI document GP16-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2009
[2] 王治国主编 临床检验方法确认与性能验证. 北京：人民卫生出版社，2009年12月.
[3] 王治国编著. 临床检验质量控制技术. 北京：人民卫生出版社，2008年8月.
