不是那么理解的,如果你不知道什么是速率法的话,建议你好好看看生化基础吧。参数问题本不该操作者考虑的,任何一个试剂厂家都会给你参数的,照着输入就行了。
Measuring point 2实际上是试剂+样本空白的吸光度值,Measuring point 1是反应物的吸光度值,当然也可以是吸光度每分钟变化值。Measuring point 2只是在两点固定点法Double Fixed或者双速率法Double Rate中才有效,终点法无效,而且必须是双试剂,否则也没意义。
Measuring point 1取点范围是0-26,但它本身就是两个点,前一个点和后一个点,如下图截图
在终点法中:
如果是一点终点法,则第一个点不输入,直接在第二点输入读点。例如下图的ALB,由于采用单试剂,不需要也没法读取试剂+样本空白,所以需要在第二点输入读点就行了,例中是第5点。
在说明书中,一点终点法的图示为:
上图只读取了27点的吸光度值,对于R1加入后的0点和S加入后的1点都不予理睬。
仪器会自动根据第一个点是否有数值来判断是一点终点法还是两点终点法,如果第一点有数值,那肯定是双试剂,也就需要读取试剂+样本空白。如下图,第一点是9,第二点是27,也就是说,第27点的吸光值读值减去第9点(R2加入前)的吸光度值。
在说明书中,二点终点法的图示为:
上图除了读取27点的值(PX),还读取了R1+S后的PZ点的值(9点)。
速率法中:
速率法必须需要两个点,给它一个时间段儿,好计算每分钟变化率。那么第一个点和第二点的间隔就是计算依据。例如下图,第一个点是14,第二点是22,那么程序会计算14到22点的吸光度变化,并计算出每分钟变化率,也就是△OD。
在说明书中,速率法的图示为:
上图只读取了R2之后的△OD/min,并没有处理R2之前的R1+S。 程序会自动识别Measuring point 2中是否有数值,如果有,又是速率法,那么就按照双数率法进行操作。例如下图,Measuring point 1分别是17和24,也就是17点到24点的每分钟变化率,是R2加入之后的。Measuring point 2分别是6和10,也就是6点到10点的每分钟变化率,是R2加入之前的,是样本+空白的吸光度值变化率,然后程序根据Measuring point 1-Measuring point 2进行计算。
说明书中,双速率法的图示为:
图中△OD1/min就是Measuring point 2的读点计算的每分钟变化,R2加入之前的R1+S的。△OD2/min就是Measuring point 1的读点计算的每分钟变化,R2之后的。
固定法就算了,没多少人采用,也意义不大。 |