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一、材料与器材
(一)留置标本的容器 1.收集和运送尿液容器应由透明且不与尿液成分发生反应的惰性材料制成;洁净、防漏、防渗,一次性使用;容积应>50ml,圆形开口的直径>4.0cm,较宽的底部和有安全的易于开启的密封装置,保证标本运送安全。 2.用于离心尿液的离心管,应具备以下条件:清洁、透明、带刻度,刻度上应至少标明10ml、1ml、0.2ml,容积应>12ml,试管口有密封装置、锥型或缩窄的底部,最好使用不易破碎的一次性塑料或玻璃离心管。 3.用于尿沉渣分析的容器、离心管、玻片必须能进行标记,便于病人标本的识别,且应保持干净。
(二)尿沉渣检测尿沉渣的量和压(涂)片厚度是标准化重要环节,在普通玻片上随意滴加沉渣液或加盖玻片(甚至不加盖玻片),不能提供标准化的结果,建议使用标准化的沉渣计数板(计数池的计数单位每小格长、宽、高分别为2×5×0.1rnm,好1µl。
(三)离心机采用水平式离心机,离心时应盖上盖,保证安全,离心时,机内温度应尽可能保持<25℃,离心机相对离心力(RCF)应在400×g左右。 离心机转速与相对离心力的换算公式为: r/min=1000×[G/(11.18×半径]1/2 r/min=1000×[400/(11.18×半径]1/2例如: 水平离心机半径为20cm时,采用1338r/min(或1350r/min) 水平离心机半径为16cm时,采用1495r/min(或1500r/min) 水平离心机半径为10cm时,采用1892r/min(或1900r/min) 注:本指南所定义“半径”为离心机轴中央到水平离心机试管底部的距离,或垂直式离心机试管口中央的距离。
(四)显微镜尿沉渣检查尽可能使用具有内置光源的显微镜,光线强度可调,应具备40倍、10倍的物镜和10倍的目镜。同一实验室如有多台显微镜,各显微镜的物镜及目镜的放大倍数应一致。
(五)自动化设备有条件的实验室也可使用各类自动、半自动的尿沉渣分析仪作为尿沉渣分析的筛选方法,但必须经权威机构认可。
(六)计算机数据处理系统 在有条件的单位,可使用带计算机成像系统的显微镜、标准化的沉渣检测系统和相关辅助软件来自动处理结果,但检查方法和尿沉渣结果报告方式须标准化。
二、标本的收集及运送
(一)标本的收集实验室工作人员、医生。护士有须要对病人留尿进行指导、务必使尿道口保持清洁。随机尿液标本的留取无特殊时间规定,但病人必须有足够的尿量;晨尿指起床后和一次尿;收集时段尿时,应告知病人时间段的起点和终点,起始时先排空膀胱;三杯试验留尿时间要分段明确,做好标记。
(二)标本的运送技上述要求留取尿液应在2小时内完成检验,结果标本收集后2小时内无法完成分析,可2~8℃冷藏,6小时内完成检验;或在尿标本中加适量防腐剂,根据不同的检查目的的选用不同类型的防腐剂(大多使用400g/L的甲醛溶液,每升尿液加入5ml。应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物,干扰显微镜检查)。送检单上应注明留尿时间、送检时间。
(三)标本的标记本容器必须有标记,包括:病人姓名、特定编码(或住院病人的病区、床号)、标本收集时间。标签应贴在其盖上。
(四)标本的接收实验室应建立严格的标本接收制度,工作人员在接收标本时,必须检查标本容器是否符合要求,标致记内容与医生所填写化验单是否一致;从留尿到接收标本的时间是否过长;标本中是否被污染;尿标本量不少于15ml,在特殊病例(如小儿、烧伤、肾衰无尿期)不可能达到此要求时,应在检验报告单上注明收到的尿量、检查方法(离心或未离心)。
三、尿沉渣检验的操作步骤
每个实验室都应该规定制度,统一尿液检查的操作方法,步骤如下:
(一)离心在>12ml离心管中倒人混匀的尿液至10ml,离心5分钟,相对离心力400×g(回转半径150cm的水平离心机1500rpm),离心后倾倒或吸去上清液,离心管底部残留的液体的量应在0.2ml处,使之浓缩50倍。
(二)镜检沉渣液混匀后,取1滴约15~20µl充液到专用塑料尿沉渣检测板里(按检测板说明书操作),先用低倍镜观察,后用高倍镜计数,计数1µl计算区内的管型或细胞数报告(即××µl)。尿结晶、管型、寄生虫等以每一高倍视野十、++、+++、+++十报告,但要求每个实验室根据实际情况有具体规定。
(三)尿沉渣的检查内容应包括: 1.细胞:红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞(肾小管上皮细胞,移行上皮细胞、鳞状上皮细胞)、肿瘤细胞等。 2.管型:透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、细菌管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型等。 3.结晶:磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶等。 4.细菌、寄生虫(或卵)、酵母菌、精子、粘液。 5.临床医生特殊要求的其他成分。
(四)有条件的实验应开展各种尿液有形成分的染色检查,以便于有形成分的进一步鉴别;具备多种类显微镜进行尿沉渣分析的实验室,建议配置相差显微镜、干涉显微镜,提高尿沉渣的鉴别能力。
尿液沉渣检查仅为尿液分析的一部分,应结合尿液理学,化学检查及临床资料综合分析,再发出报告。尿沉渣检查应开展质量保证,进行尿沉渣检查的教育和培训,技术未达到熟练程度要求者不得上岗。做好分析后质量保证工作。
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