[转帖]血凝仪原理概述

止血与血栓分子标志物的检测指标与临床各种疾患有着密切联系，如动脉粥样硬化，心脑血管疾病、糖尿病、动静脉血栓形成，血栓闭塞性脉管炎、肺栓塞、妊娠高血压综合症、弥散性血管内凝血、溶血尿毒综合症、慢性阻塞性肺炎等。中医药关于活血化瘀的理论与治疗工作研究也都涉及止血与血栓问题。为使临床准确运用这些指标进行诊断，卫生部印发了《关于出凝血时间检验方法操作规程》，对活化部分凝血活酶时间（APTT）和血浆凝血活酶时间（PT）等操作方法进行了详细规范。因此使用血液凝固分析仪（以下简称血凝仪）对血栓和止血进行实验室检查成为必要。血凝仪分为全自动与半自动两类。为结合在省内大多数医院的实际需要，本文仅涉及半自动血凝仪工作原理并对德国BE公司的半自动血凝仪做简要介绍。
　　目前国内外各生产厂家生产的半自动血凝仪都是基于凝固法对血液凝固过程进行测量的。血液凝固是一系列凝血因子连锁性酶反应的结果。血液中的凝血因子以无活性酶原形式存在，当某一凝血因子被激活后，可使许多凝血因子按一定的次序先后被激活，彼此之间有复杂的催化作用，被称为“瀑布样学说”。这种“瀑布样学说”产生的激变在血液的生物物理特性上表现为，电阻增大（电流法）粘度增强（磁珠法），浊度上升（光学法）。由于电流法测量可靠性差，因此为磁珠法和光学法所替代。
　1、光学法（比浊法）
光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。根据仪器不同的光学测量原理，又可分为散射比浊法和透射比浊法两类。
　　（1）散射比浊法：散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90O直角，当向样品中加入凝血激活剂后，随样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的散射光强度逐步增加。当样品完全凝固以后，散射光的强度不再变化，通常是把凝固的起始点作为0%，凝固终点作为100%，把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理，描出凝固曲线。
　　（2）透射比浊法：透射比浊法，是根据待测样品在凝固过程中吸光度变化来确定凝固终点的、与散射比浊法不同的是该方法的光路同一般的比色法一样呈直线安排：来自光源的光线经过处理后变成平行光，透过待测样品后照射到光电管变成电信号，经过放大后监测处理。当向样品中加入凝血激活剂后，开始的吸光度非常弱，随着反应管中纤维蛋白凝块的形成，标本吸光度也逐渐增强，当凝块完全形成后，吸光度趋于恒定。血凝仪可以自动描绘吸光度的变化曲线并设定其中某一点对应的时间为凝固时间。
　2、磁珠法
磁珠法是根据血浆凝固过程中粘度的变化来测量凝血功能的。根据仪器对磁珠运动测量原理的不同，又可分为光电探测法和电磁珠探测法。
　　（1）光电探测法：在磁珠法中光电探测器的作用与光学法中不同，它只测量血浆凝固过程中磁珠的运动规律，与血浆的浊度无关。在磁珠法中的一对电磁铁安放在测试杯的两端，它们产生恒定的交替磁场使磁珠在测试杯中摆动，在与磁珠摆动的垂直方向安放一对光电接收装置，当磁珠摆幅衰减到50%时确定凝固终点。
　　光电探测法中还有一种利用红外光反射监测器监测磁珠运动的，下面介绍BE系列半自动血凝仪中将另加介绍。
　　（2）电磁探测法：电磁探测法又可称为双磁路磁珠法，其中一对磁路用于吸引磁珠摆动，另一对磁路利用磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生的电信号，对磁珠摆动幅读度进行监控，当磁珠摆动幅度衰减到50%确定凝固终点。
　　光学法和磁珠法用于血凝检测，就方法论而言各有千秋，光学法的优点在于结构简单、灵敏度高。易于自动化等。缺点在于易受特异血浆干扰，对此各厂家已采取不同措施予以弥补。磁路法优点不受特异血浆的干扰，试剂量少，缺点，磁珠的质量、杯壁的光滑程度等，均会对测量结果造成影响。一些厂家为推销自身产品在方法论上大做文章，片片面强调某种方法的优越性是不足取的。其一目前各国生产的血凝仪两类方法并存，且光学法占据主导地位，在全自动血凝仪中尤其如此。其二判断仪器的优劣有多种方面包括方法、设计、工艺等。

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