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正常的多点非线性定标应该是浓度高反应幅度越高,虽说不是线性的,但在定标浓度范围内总体反应趋势还是上升的。
但今天碰到一个多点定标的试剂却是反过来的:原点(零点)的反应幅度是最高的,随着浓度的增加反应幅度相应降低,然后悲剧了。定标曲线拟合直接成了一个“L”型曲线,测试临床结果总是为“0”
各位大神有没有遇到这种情况?如何解决?
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多点定标曲线向下的反应不少,糖化和大部分药物监测项目都是如此,问题不在向下,而是结果为0,你该把结果为0的反应曲线和这个项目的定标曲线发上来,然后再分析。
你这是定标失败,而定标失败就不该做标本,既然做了标本,结果都是0,那就不要怪任何方面。我不知道这是什么机型,你该重做定标,将定标的条件适当放宽,必要时改为样条定标。
还有这个标准是厂家给好的5个标准还是你自己稀释的?2、3点和4、5点间隔那么近,这样的定标怎么能准确了?你不如用最高浓度自己倍比稀释,然后再加一个水点重新定标试试。
多谢老大,这么晚了还回复我。
我现在正在试。定标液是厂家配好的,其实我没有拿这个试剂做样本,后来我用ALB和混合血清在模拟定标,定出来的曲线和上面的差不多。我就用ALB做了几个样本,发现不行。我猜想是不是零点与第一点差距太大引起的。现在正在试,如果能成功我再传曲线。
楼主上传的有图片。有真相就好分析,标准曲线的正斜率和负斜率无所谓,这和该项目的检测方法设计有关系,他的问题是选的曲线拟合方法不对。曲线拟合就是找“关系”,浓度和反应度的关系,曲线拟合方法的选择原则就是:能让最多的有效已知点最大限度靠近曲线和最多的有效已知点处在曲线上,并且光滑。这样“关系”顺畅,相关系数就高。实在不行可以选择点到点方法,就是线段曲线拟合方法。无论哪种方法都得先剔除无效点。有时候试剂盒说明书建议的曲线拟合方法并不是最好的。
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