请教校准方法方面的问题

各位大师
  Logit-log3P（非线性法）、 Logit-log4P（非线性法）与Logit-log5P（非线性法）都是随着浓度升高而吸光度收敛的工作曲线，那它们有区别吗？它们与定标个数有关、还是和吸光度变化有关、还是与其他因素有关？例如载脂蛋白A1有5个浓度 0   0.3   0.6   1.2   2.4 用哪个方法 ？ 还是哪个方法都行？如果与定标个数有关、0 浓度算一个定标点吗？指数函数法 ，样条函数法 ，折线函数法又是根据什么来确定的呢？麻烦各位大师不吝赐教

这四张图就是对数和指数曲线的示意图，二者正好相反，对数是浓度增加吸光度收敛，指数是浓度增加吸光度发散。
仔细看X轴的浓度和Y轴的吸光度的对应关系，以对数4P为标准来看，5P的浓度和吸光度的关系是浓度越高，吸光度的上升幅度越低；而3P与5P正好相反，浓度越高吸光度变化稍大。但在统计上，3P和4P的统计意义差别不大，所以很多机型只有4P和5P的区别，并没有3P的公式。
而指数曲线则与对数相反，浓度越高，吸光度变化变得发散，可能上升幅度低，也可能上升幅度高。
这里都是以上升反应为例的，下降反应倒着理解就行了。
而样条曲线就不给图了，双转折曲线而已。折线其实是手工校准的一种方法，将各个点用直线相连，每个点之间有各自的斜率。
在生化校准中，多点校准几乎都是免疫项目，特定蛋白或乳胶比浊的项目，这些项目几乎都是符合样条曲线的特征。从理论上来讲，无法根据单纯的浓度值来决定用什么校准曲线，必须结合相应各点的吸光度值进行描点判断，但用样条曲线肯定是没错的。特别是倍比稀释的校准品。关于样条曲线，举个例子就行了，所有的化学发光都是针对免疫项目，其固相顺磁技术类似乳胶增强比浊，在这些方法中，夹心法和捕捉法都是正的样条曲线，竞争法则是负的样条曲线，没有别的曲线。
但很多厂家的试剂配备了多点校准品，并非倍比稀释的，而是自定义靶值，而这些自定义靶值的校准品测定出来之后，几乎可以满足对数4P甚至5P的曲线，所以人家的参数设置里就是对数（也有用折线的，采用这种方法几乎不管参数是否正确，100%成功）。但如果你取这组校准品的最高浓度点自行倍比稀释的话，就会发现竟然也是样条曲线。
在生化仪中，不同的仪器厂家和不同的试剂厂家或校准品厂家的参数匹配有些混乱，有的仪器在校准不成功的情况下也会给出不成功的校准曲线，这样我们可以看出校准不成功的原因，例如有一个或几个点背离设计的校准曲线导致不成功；有的甚至出现逆转，上升趋势的曲线突然有一个或几个点低于前面一个点的吸光度，而造成无法拟合曲线。出现这种情况我们就要检查这几个点的校准液选择和放置以及准备是否正确，还要检查整个项目的参数是否正确（比如最典型的就是读点错误导致的高点校准品吸光度反而低于前一点）。
而有些厂家并不会给出校准失败的校准曲线，只会报错并旗标提示。甚至更有厂家连校准曲线都不给，只能依靠给出的浓度和吸光度的列表自行描点绘图才能看出来。同样有些仪器厂家的程序对校准曲线的验证极为严格 ，稍微背离一点儿就判为失败，比如样条曲线的两次转弯处相差稍微远一点儿就会校准失败。
根据你的载A校准液浓度来看，直接采用样条曲线即可。如果出现校准不成功，应当找出原因，而不是通过修改公式来解决，那样是解决不了问题的。

多谢老大 。  载脂蛋白A 试剂盒 给出别的生化仪参数是4P ，我用的是5P ， 0 浓度算一个标准 ， 定标成功  ， 以前我用4P 也成功了 ， 但是4P拟合曲线不算太好 。那么5P曲线可以用吗 ？ 用了对结果有什么影响吗？

4P和5P在正常值及以下没多大影响，数值的差异没有统计学意义，但在高值或极高值差异较大。机器不同定标的效果也不同，很多机器不验证曲线，你告诉它什么曲线它就给你描点，所以这种机器你用什么曲线都能定标成功，不要纠结为什么用错了校准曲线却也成功了。

受益匪浅  多谢老大

郑老师讲的就是细腻 ，受益匪浅

学习了，谢谢郑老师。

挺给力的，以前一直以为logit-4p和5p都是按校准点来计算的。原来本质上差异并不大，而是方程拟合的区别。

郑工的工作相当认真，非常值得我们晚辈们的学习

多谢郑工，学习了

学习了。原来是拟合曲线方程的区别，而不是定标浓度点数的差异。

这几天被这问题困扰呢

看起来好难啊

学习了，谢谢郑老师

学习了！

校准方法学习了

多谢郑工，学习了

学习了

郑工的工作相当认真，非常值得我们晚辈们的学习