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罗氏电化学发光是如何两点定标的,很疑惑

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赵建康 发表于 2017-8-19 13:50 | 显示全部楼层 |阅读模式

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郑振寰 发表于 2017-8-19 15:00 | 显示全部楼层
RD罗氏诊断的电发光校准分为三个层次,第一级是RD Development,也就是研发这一层,校准品点数达到12个;
第二层是RD production生产层,试剂盒生产出来后,简化为6个校准点进行对数或样条校准,也就是仪器上说的RCM1或RCM2这些方式。由于试剂和仪器非常稳定,相对于校准曲线来说也非常稳定,没有必要让用户也进行六点校准,繁琐不说,成本高,用户还难掌握,因此有了第三层。
第三层Customer,客户层面,只用两个校准品做修正,修正第二层的主曲线。下图就是厂家给出的三层校准的曲线图及相互关系:

图中显示在精度不变的情况,越来越省事。
要说明的是,客户层的两点校准不是常见的线性校准,而是主曲线(例如图中的对数曲线)的两点修正。比如主曲线六个点,客户用的校准品是第2点和第4点(等值或不等值),这两点测定后,修正整条主曲线。
主曲线的四个主要参数编制在试剂盒二位码(PDF417)中。
而电发光仪器中的校准方式有 三种,分别是Rodbard、Linear、Linear reciprocal并不是主曲线的方式,而是两点修正点的计算方式。指的是修正点前后按照Rodbard曲线方式,还是Linear、Linear reciprocal线性或线性倒数方式。
不过说这么多也没什么用,校准方式、参数、校准值、判断规则都是内定的,要么在试剂盒条码标签上,要么在校准品条码卡上,用户能修改的地方不多,只要校准通过就行了。

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有情 发表于 2017-8-20 12:56 | 显示全部楼层
郑老师说得很详细!
 楼主| 赵建康 发表于 2017-8-20 13:08 | 显示全部楼层
老大,是否可以理解为对于某个试剂 定标曲线的形状是出厂前测定出来的,只需要把它的位置和客户那里的两个定标液的点匹配上来?
另外第一步中试剂没有研发出来的情况下12个定标点是怎么得出曲线的?

郑振寰 发表于 2017-8-20 13:15 | 显示全部楼层
第一步是研发,不是没有研发出来。
你说的第一段就是主曲线修正。
万小斌 发表于 2017-8-20 18:26 | 显示全部楼层
精辟,学习了!
木鱼沐浴 发表于 2017-8-21 08:08 | 显示全部楼层
学习了
linzhiming 发表于 2017-8-21 10:13 | 显示全部楼层
厉害
小虫 发表于 2017-8-21 16:14 | 显示全部楼层
学习了  谢谢老大
 楼主| 赵建康 发表于 2017-8-21 18:48 | 显示全部楼层
老大什么时候出个罗氏免疫的培训视频啊?
 楼主| 赵建康 发表于 2017-8-31 10:53 | 显示全部楼层
郑振寰 发表于 2017-8-20 13:15
第一步是研发,不是没有研发出来。
你说的第一段就是主曲线修正。

老大请问一下E411样本和试剂是如何混匀的?是靠吸吐吗?
郑振寰 发表于 2017-8-31 10:56 | 显示全部楼层
赵建康 发表于 2017-8-31 10:53
老大请问一下E411样本和试剂是如何混匀的?是靠吸吐吗?

R1和样品是靠加入试剂的冲击混匀,R1+S+R2+M磁微粒孵育后混匀,是靠涡旋混匀,有专门的混匀站。
 楼主| 赵建康 发表于 2017-8-31 10:59 | 显示全部楼层
郑振寰 发表于 2017-8-31 10:56
R1和样品是靠加入试剂的冲击混匀,R1+S+R2+M磁微粒孵育后混匀,是靠涡旋混匀,有专门的混匀站。 ...

E411没有涡旋混匀吧?您说的涡旋混匀是E601吧?
 楼主| 赵建康 发表于 2017-8-31 11:02 | 显示全部楼层
分析流程里好像没有介绍如何混匀


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郑振寰 发表于 2017-8-31 11:03 | 显示全部楼层
赵建康 发表于 2017-8-31 10:59
E411没有涡旋混匀吧?您说的涡旋混匀是E601吧?

E411没有,冲击混匀,e601是涡旋。
 楼主| 赵建康 发表于 2017-8-31 11:23 | 显示全部楼层
找到了。After dispense, the S/R probe descends further until it is 0.8 mm above the bottom of the cup and aspirates the entire volume of reaction mixture. The probe rises while dispensing the reaction mixture back into the cup, thereby mixing the solution and accelerating the reaction in the cup. This mixing takes place only once.
poctliu 发表于 2017-8-31 11:24 | 显示全部楼层
郑老师厉害
z20031192 发表于 2017-8-31 17:13 | 显示全部楼层
学习了
18953686922 发表于 2017-9-6 11:57 | 显示全部楼层
谢谢老大
david.dong 发表于 2017-10-31 21:14 | 显示全部楼层
学习了  感谢
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