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[转发]凝血酶原时间标准曲线半定量测定?纤维蛋白原含量的方法的临床应用

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郑振寰 发表于 2006-1-16 09:12 | 显示全部楼层 |阅读模式

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凝血酶原时间标准曲线半定量测定?纤维蛋白原含量的方法的临床应用

半自动血凝仪可同时对5个参数进行测定,利用凝固法+FiB测定,制定标准曲线进行半定量检测FiB,简便,易行,建立一种直接检测FiB含量的方法。
1.材料与方法
1.1仪器和试剂?
1.1.1仪器Thromboscreen400CB半自动血凝仪(美国)721比色仪37℃水浴箱。?
1.1.2试剂兔脑凝血活酶Thromboplastin-DSP/N535301FiB Reference plasma Human 560502。仪器定标血浆Standard Human Plasma(美国),DADE BEHRING公司,ORKL25。?
质控血浆Leve1Ⅰ,Level Ⅱ(美国)DADE BEHRING公司。?
1.2研究对象及标本处理?
1.2.1研究对象随机抽取50例正常健康体检人,其中男32例,女18例,平均32岁(21~43)。
1.2.2临床标本处理顺利抽取静脉血1.8mL血,注入0.2mL枸橼酸钠(0?38%)的塑料试管,混匀,1000转离心5min,分离血浆,PT检测2h完成。
1.3方法。
1.3.1FiB检测方法手工法测不同浓度Control plasma血浆,方法按说明进行。?
1.3.2 FiB直接检测方法:用半自动血凝仪对不同浓度的Control plasma血浆测定PT凝固时间及吸光度,重复三次,取均值,建立不同浓度及其PT凝固时间,吸光度,FiB含量的曲线。待检血浆FiB含量测定:按仪器说明书测定待检血浆的PT时间及吸光度,利用曲线直接得到FiB含量。?
2.结果
FiB参比血浆FIB值的效正及FiB标准曲线的制备。?
用Thromboplastin-DS试剂测定FiB参比血浆的FiB值与PT凝固时间及吸光度制备的标准曲线。?
2.1方法学简单评价?
2.1.1线性分析,从标准曲线上看到,FiB值在1.0~4.5范围内,与其测定PT时的吸光度有很好的线性关系。
2.1.2同一试剂重复性测定,按上述FiB直接测定法,用Thromboplastin-DS凝血酶将FiB参比血浆重复测定10次,计算CV值,五瓶参比血浆(FiB)测定结果为:2.03,1.85,1.93,1.95。可见手工法与直接法测定较接近。
2.2临床标本检测,用Thromboplastin-DS凝血活酶试剂直接测定法,手工法测定患者FiB,结果显示两方法之间有很好的相关性(r=0.99)。将本方法与手工法结果进行t检验,表明本方法检测的FiB值接近手工检测值,t为0.583,p为0.023,无明显差异。?

3.讨论
本文建立的FiB测定法只须用标定了FiB值的冻干参比血浆建立FiB对PT(s)及吸光度的标准曲线,因而容易在临床实验室开展,实验结果显示该方法测定的FiB值接近测定血浆的“真值”,简便,易行。但该方法由于采用的是凝固法,因此溶血及黄疸的标本不易用本法测定。影响吸光度的测定,由于本法是在单一实验室完成,本方法临床实用性尚须多家实验室共同研究论证。?
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