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[转发]细菌和真菌标本的采集指南表

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郑振寰 发表于 2006-1-26 10:36 | 显示全部楼层 |阅读模式

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细菌和真菌标本的采集指南表(一)

标本类型

(参考)

采集

时间和温度

复检

限制

备注

指南

运输器件和/或最低量

运送

保存

脓肿

用无菌生理盐水或70%的酒精擦洗去表面的渗出物

组织或脓液优于拭子标本。如果不得不用拭子,则一只作培养,一只作Gram染色。

切口标本

尽量能抽取标本或将拭子插入伤口深处确保采集到伤口前沿的标本。

拭子运送培养基

≤2h ,室温

≤24h,室温

1次/天/部位

底部和脓肿壁上的标本的检出效率最高。

而从接触到空气的感染灶表面采集的标本会被污染。

*封闭感染病灶标本

用针管抽取脓肿壁部位的标本。用无菌手段将所有的取材转入厌氧运送管或直接注射器排出空气后送交。

参见脓肿部分

厌氧运送管或注射器(不得有空气),≥1 ml

≤2h ,室温

≤24h,室温

1次/天/部位

咬伤伤口

≤ 12 h的咬伤伤口不需采标本作培养(通常不能检出病原)除非伤口在面部或手上或者有感染迹象。

血液培养(15,31,33,42,43)

消毒培养瓶:用70%的碘酒消毒橡皮塞并等待1分钟。

先要触诊找到静脉

消毒穿刺部位:

1. 用70%的酒精消毒所选部位。

2. 用碘酒从中心位向外划圈消毒

3. 待碘酒干。

4. 不能再触摸消毒部位。

5. 采集血液。

6. 采完血后用酒精脱碘。

菌血症:成人每份采血量为10—20 ml

再多一些量检出会更高

婴幼儿,1—10 ml/份

真菌:

1. 双相培养瓶

2. 细胞溶解—离心管

≤ 2 h ,室温或按说明书

24h内采3份血培养

急性败血症:采集2—3份血液培养并要在10分钟内完成

心内膜炎,急性的:分别从不同部位采3 份血液培养,1—2小时内完成

亚急性心内膜炎:从3个部位采集3份血培养,间隔≥15分钟。如果24 h培养阴性,再采3份血。

发热待查:间隔≥1 h于不同部位采2—3份血,若培养24 h阴性再采2—3份血。

一些资料表明,添加一份需氧瓶或真菌瓶要比加厌氧瓶的检出率更高。

骨髓

在穿刺一侧做好准备工作。

接种于血液培养瓶中或溶解细胞—离心试管中

≤24h,室温如果已接种入血培养瓶或溶解—离心管

≤24h,室温

1次/天

少量的骨髓可直接接种在培养平板上。

烧伤标本

在采集标本之前清洁并清除烧伤创面。

组织放入带螺帽的容器中

渗出物用拭子

≤ 2 h,室温

≤ 24 h,室温

1次/天/部位

若要作定量培养时一块3—4mm的活检组织切块最佳。

只能作需氧培养。

定量培养无价值。烧伤表面标本的培养会产生误导作用,不宜采用。

导管:

i.v.(17,30,32)

1.酒精消毒导管周围的皮肤。

2. 以无菌手段取出导管,在其末端剪取5 cm直接放入无菌试管。

3.直接送到微生物实验室以防标本干。

带螺帽的无菌试管﹑小瓶或带螺帽的无菌小杯

≤ 15min,室温

≤ 24 h,4℃

可用于半定量培养的导管(Makimethod):

中央导管, CVP导管 , Hickma导管 , Broviac导管 , 外围导管,动脉导管,脐带导管,高营养导管 , Swan-Ganz导管

※用注射器抽取的抽吸物(腹水,胸水,羊水,胆汁,肺抽吸物,深部伤口抽吸物,窦内抽吸物,耻骨上穿刺液脓肿等)可排除空气后直接注入厌氧瓶内。

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 楼主| 郑振寰 发表于 2006-1-26 10:37 | 显示全部楼层

细菌和真菌标本的采集指南表(二)

标本类型

(参考)

采集

时间和温度

复检

限制

备注

指南

运输器件和/或最低量

运送

保存

Foley导管(35)

不作培养,因为生长的细菌只代表尿道口的正常菌群。

不可作培养

蜂窝组织炎标本

1. 无菌生理盐水或70%的酒精擦拭清洁感染部位。

2. 针管抽取的位置为发炎最严重的区域(一般在中心而不在前沿)。

3. 先用注射器吸入少量的无菌生理盐水再抽取标本注入带帽的无菌试管内。

无菌试管(不推荐使用注射器)

≤15min,室温

≤24h,室温

培养出潜在的病原体只有25—35%。

脑脊液(CSF)(19,41,49)

1. 用2%的碘酊消毒。

2. 插入针头(型号为L3—L4,L4—L5,或L5—S1)。

3. 进到蛛网膜下,抽取CSF,取出针头将CSF注入3支经检查为不漏的试管中(每管1—2 ml)。

带螺帽的无菌试管

最低要求量:

细菌检测,≥1 ml

真菌检测,≥2 ml

抗酸杆菌(AFB)≥2 ml

病毒检测≥1 ml在冰上

细菌检测:决不能冷藏;

≤ 15min,室温

≤ 24 h,室温

同时也作血液培养。如果只有一管CSF应该将其先送往微生物实验室;要不就送2管。

脑脓肿的抽吸物或活检组织有必要检测厌氧菌或寄生虫。

褥疮溃疡(46)

不选用拭子

1. 用无菌生理盐水清洗表面。

2. 如果活检取材不能用,可用拭子用力在伤口底部采集标本。

3. 将拭子放入适当的运输器件中

拭子运输培养基(需氧菌)或厌氧运送管(组织)

≤2h ,室温

≤24h,室温

1次/天/部位

由于decubitus溃疡拭子没有多少临床价值,其最后的检验结果不好。

组织活检取材或针管抽取物较好。

牙科标本的培养:牙龈的,牙周的,根尖周的,奋森氏口腔炎

1. 仔细清洁牙龈的边缘和牙周上牙齿表面,清除唾液﹑残渣﹑及牙斑。

2. 用牙周刮器,仔细取出牙龈下的病变物并转入厌氧运送器件中。

3. 用同样采集的标本涂片染色。

厌氧运送管

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

牙周的病变部位的取材只能用由实验室提供的设备用特殊的技术来检测病原体并作记数。

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 楼主| 郑振寰 发表于 2006-1-26 10:37 | 显示全部楼层

细菌和真菌标本的采集指南表(三)

标本类型

(参考)

采集

时间和温度

复检

限制

备注

指南

运输器件和/或最低量

运送

保存

耳:

* 内耳(2)

对于复杂的,慢性持久的中耳炎保留鼓膜穿刺液。

1. 对于完整的耳鼓膜,用肥皂水清洗耳道,用注射器技术采集液体标本

2. 对于破裂的耳鼓膜,用柔软的拭子经听觉窥镜采集液体。

无菌试管,拭子运输培养基,或厌氧运送管

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天/部位

咽拭子或鼻咽拭子的培养结果不能预示代表中耳炎的病原体,而且咽拭子或鼻咽拭子不能作此用途。

外耳(2)

1. 用湿润的棉拭子将耳到内的碎片和外皮清除

2. 在外耳用拭子稳定地转动采取标本。

拭子运送培养基

≤2h,室温

≤24h,4℃

1次/天/部位

对于外耳,拭子采样要用力,因为表面拭子采样可能会漏掉链球菌性蜂窝组织炎。

眼部

结膜(1,27)

1. 分别用拭子于双眼采样(预先要用无菌盐水湿润),拭子在结膜上滚动采样。

2. 床旁接种标本于培养基。

3. 涂2张片作染色。

直接接种于:血平板和巧克力平板或拭子运送培养基

平板:≤ 15 min ,室温

拭子:≤ 2 h ,室温

≤ 24 h,室温

如果可能,即使只有一个结膜感染也要取两个结膜的标本,以排除原有菌群的干扰。

如果费用有困难,就只有靠Gram染色来协助解释培养结果。

角膜刮取物

(1,72)

1. 如上所述方法获取拭子标本。

2. 滴注2滴麻醉剂局部麻醉。

3. 用无菌刮刀在溃疡或病灶位刮取样本,直接接种在培养基中。

4. 用余下的标本涂在两张干净的玻片上用作染色。

直接接种培养:BHI加10%的羊血,巧克力平板和含抑制剂霉菌琼脂。

≤15min,室温

≤24h,室温

用拭子采集标本最好在使用麻醉剂之前,而刮取角膜样本可以在麻醉之后。

液体或抽取物(44)

消毒清洗眼部,为用针管抽取液体做准备工作。

带螺帽的无菌试管或直接接种少量液体在培养基上。

≤15min,室温

≤24h,室温

1次/天

包括真菌培养基。麻醉剂对有些病原体有抑制作用。

粪便

常规培养(44)

直接将粪便装入一个干净﹑干燥的容器中。一小时内送到微生物实验室,或用拭子挑取一块转入运输培养基中。

干净﹑防漏﹑宽口的容器或拭子运送培养基;≥2 g

非保护状态:≤1h,室温

≤24h,4℃

1次/天

对于住院>3天而且入院诊断为非胃肠炎的患者不作常规大便培养。

对于这些患者应考虑作艰难梭菌的培养和毒力试验

除了婴幼儿和急性腹泻患者,不推荐拭子采样作常规病原体的培养(见直肠拭子)。

艰难梭菌

(3,28,44)

直接将水样便或软便装入一个干净﹑干燥的容器中。软便呈现为所盛容器的形状。

拭子标本不宜用于毒素试验。

无菌﹑防漏﹑宽口的容器;≥5 ml

≤1h,室温

1-24h,4℃

>24h,-20℃

2天,4 ℃用于培养

3天,4 ℃或更长-70℃用于毒素试验

1/2天

患者应该是每24小时排稀便或软便≥5次。

从成形便或硬便中检出艰难梭菌往往很难,检出的艰难梭菌也属正常携带。

宫颈分泌物

1. 窥镜无润滑剂观察宫颈;

2. 用棉拭子擦去颈部的粘液和分泌物,弃掉棉拭;

3. 重新用无菌棉拭小心轻轻地从颈管采取标本。

拭子运输培养基

≤2h,室温

≤24h, 室温

1次/天

关于采集和运送病毒和衣原体标本的相关内容见相关部分。

淋病奈瑟氏菌见于流出分泌物,而衣原体感染特定的细胞。

*盲管

送检抽取物或腔内液体

厌氧运输器,>1ml

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

宫颈内取材

1. 用电子内窥镜导管经宫颈抽吸标本,

2. 将所取材转入厌氧运输装置中。

厌氧运输管或注射器(不得有空气),>1 ml

≤2h,室温

≤ 24h,室温

1次/天

妊娠生成物

1. 用无菌容器运输部分组织。

2. 如果是因破腹产获得的,应立即转入厌氧运输装置中。

无菌试管或厌氧运送管

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

不要取恶露,其培养结果不可靠

尿道内采取的标本

在患者小便1h后采集

1. 擦去尿道口渗出物

2. 经阴道在耻骨联合处按摩尿道用拭子采集排出物

拭子运输培养基

≤2h, 室温

≤24h,室温

1次/天

如果没能获取排出物,用聚烯吡酮碘〔局部抗感染药〕肥皂清洗外尿道并用水清洗。将一泌尿生殖道拭子插入尿道内2—4 cm,转动拭子2秒。

阴道内标本

(16)

1. 擦去多余的分泌物或排出物

2. 用无菌的拭子或吸管从阴道穹窿粘膜采取分泌

3. 如果要作涂片,则另用一根拭子

拭子运输培养基

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

对于子宫内的器件,要将其整个的放入无菌的容器中,室温下送检。

要求作一份Gram染色以确认是否为细菌性阴道炎。以防培养不正确并会误导我们。

生殖器标本:女性或男性,病灶

1. 用生理盐水清洁病灶并用无菌手术刀片移开病灶表面的东西。

2. 待分泌物积累。

3. 挤压病灶底部,同时用无菌拭子用力采取渗出物。

拭子运输培养基

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

作一份暗视野检查以排除梅毒,用载玻片蘸取一些渗出物,盖上盖玻片,装在一湿润小盒(培养皿内放一湿润纱布)立即送往实验室。送检的梅毒检验标本不作培养。

尿道标本

将一泌尿生殖道拭子插入尿道内2—4 cm,转动拭子,至少停留2秒促进吸附标本。

拭子运输培养基

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

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 楼主| 郑振寰 发表于 2006-1-26 10:38 | 显示全部楼层

细菌和真菌标本的采集指南表(四)

标本类型

(参考)

采集

时间和温度

复检

限制

备注

指南

运输器件和/或最低量

运送

保存

毛发,真菌病标本

(21)

1. 用镊子夹取至少10—12根受侵袭的头根未 受损的毛发。

2. 放入一干净的试管或容器内。

干净容器,10根毛发

≤24h,室温

1次/天/部位

如果有病变,随同活性病灶边缘刮取物收集头皮鳞屑。要求近期没有任何抗真菌治疗。

指甲,脚癣(5)

1. 用蘸有70%的酒精的纱布擦拭指甲(不是用棉签)。

2. 将感染的大部分剪除掉,采集指甲下的样本或碎屑。

3. 将样本放在干净的容器中。

干净的容器

足够的刮取物覆盖在thumbtack

≤ 24h, 室温

1次/天

毛囊脓肿

见脓肿

呼吸道的,支气管肺泡灌洗液,支气管刷取物或洗清液,气管抽吸物

1.将抽取物或清洗液放入痰收集器中。

2.将刷取物放入装有盐水的容器中。

无菌容器,>1 ml

≤2h, 室温

≤24h,4℃

1次/天

作定量分析需要40—80 ml量的液体。

作刷检物的分析,将刷放入0.5ml的胰豆肉汤中。

痰,咳出的痰

(5)

1.要在护士或医生的指导下取标本。

2.先要让患者用凉开水清洗或漱口以清除口腔内的正常菌群。

3.指导患者深咳嗽以获得下呼吸道的标本(不鼻后液体)。放入一无菌的容器中。

无菌容器,>1 ml

最低量:

细菌,>1 ml

真菌,3—5 ml

分支杆菌,5—10 ml

寄生物, 3—5 ml

≤2h, 室温

≤24h,4℃

1次/天

儿科患者不会咳出痰,医生应该采用抽吸方式获取标本。最好≤10 个磷状上皮细胞/100 个视野。

痰,诱发痰

1. 要让患者在刷洗了牙齦之后再用清水清洗口腔。

2. 借助雾化器使患者吸入约25 ml 3—10%的无菌盐水。

3. 采取诱发痰放入无菌容器中。

无菌容器

≤2h, 室温

≤24h,室温

1次/天

一旦采集到标本后荚膜组织胞浆菌和皮炎芽生菌只能短时间存活。

呼吸道发现的真菌主要为隐球菌和产菌丝的真菌,其它的酵母菌很少引起下呼吸道感染。

呼吸器官,

上部口腔标本

1.用棉签清除口腔病灶表面的分泌物和碎屑,扔掉。

2.用第二根拭子用力采取病灶部位的标本,不要碰到其它正常组织。

拭子运输培养基

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

从表面组织获取的标本不利于对细菌的评价。

应选择活检组织或抽吸物作为检测标本。

1. 用事先经盐水湿润的拭子插入鼻孔,约2 cm。

2. 将拭子贴着鼻粘膜转动。

拭子运输培养基

≤2h, 室温

≤24h,室温

1次/天

鼻前(anterior nose)部标本用作培养葡萄球菌和链球菌。

最好用内窥镜取标本。

鼻咽标本(2)

1.将一藻酸钙拭子经鼻腔轻轻插入鼻咽后部

2.缓慢转动5秒钟以吸收分泌物。

3.取出拭子并床边接种或将拭子放入运送培养基。

直接接种于培养基或拭子运输培养基

平板:≤15min,

室温

拭子:≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

咽拭子

1. 用一压舌板压住舌

2. 用无菌拭子在后咽部,扁桃体,及发炎部取标本。

拭子运输培养基

≤2h,室温

≤24h,室温

1次/天

咽拭子培养禁忌用发炎会厌的标本。

作淋球菌培养的拭子要用含碳粉运送培养基送检并于12h内接种于平板,JEMBEC,Biobags, & GonoPak 就适用于在室温下运送此类标本。

皮肤癣,脚癣

1. 用70%酒精清洁感染部位。

2. 轻轻刮取皮肤病变有效部位边缘,勿刮出血。

3. 将标本放入干净容器中或夹在两张干净载玻片间。

干净容器,enouph scrapings to cover the head of a thumbtack

≤ 24 h, 室温

1次/天/部位

如果标本是夹在载玻片中送检,要将玻片捆扎起来装在信封内送检。

组织

1. 装在无菌容器中送检。

2. 对于少量的标本要加几滴无菌盐水保持湿润。勿让组织变干燥。

厌氧运送管或无菌带螺帽的广口瓶。

需要加入盐水保湿。

≤ 15min,室温

≤24h,室温

通常送检标本要尽量多。若有可能要留一些外科组织标本于-70℃ 以备作进一步的研究之需。

绝不能送检在表面摩擦的拭子。

用作定量分析的标本在2*1cm,即大约500mg ,较适宜。

盐水对一些军团菌可能有抑制作用。

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细菌和真菌标本的采集指南表(五)

标本类型

(参考)

采集

时间和温度

复检

限制

备注

指南

运输器件和/或最低量

运送

保存

尿液

女性中段尿(12)

1.用肥皂和水彻底清洗尿道口

2.用纱布块轻洗

3.分开阴唇,排尿。

4.在排出几毫升尿后,不要停止,接取中段部分的尿液。

无菌、广口容器,≥1 ml

未保护的:

≤2h,室温

保护的:

≤24h,室温

≤ 24h,4℃

1次/天

将女性尿液用于检测衣原体抗原可能无效(36)。尿液对细胞系有毒性并不适宜作衣原体的培养。

中段尿用于作细菌培养。

男性中段尿(12)

1.用肥皂和水清洗龟头。

2.用湿润纱布块轻洗。

3.回拉开包皮,排尿。

4.在排出几毫升尿后,不要停止,接取中段部分的尿液。

无菌,广口容器,≥1 ml

未保护的:

≤2h,室温

保护的:

≤24h,室温

≤ 24h,4℃

1次/天

前部分尿用于作衣原体的探针检测和抗体检测。与上次排尿间隔2 h 再取得的中段尿用作培养。

直导尿管 (12)

1.肥皂和水彻底清洗尿道口

2.用湿润纱布块轻洗。

3.采用无菌手段将导管插入膀胱。

4.在流出约15 ml 后,采集尿液在一无菌容器中。

无菌防漏的容器

保护的:

≤24h,室温

未保护的:

≤2h,室温

≤ 24h,4℃

1次/天

此过程可能会将尿道口的正常菌群带入膀胱中并增加医源性感染的危险。

内导管(45)

1.用70%的酒精消毒道管的采集部分。

2.用针管或注射器无菌采集5 到10 ml 尿。

3.将尿转入无菌拭管或容器中。

无菌防漏的容器

未保护的:

≤2h, 室温

保护的:

≤24 h, 室温

≤ 24h,4℃

1次/天

创伤

见脓肿

※ 用注射器抽取的抽吸物(腹水,胸水,羊水,胆汁,肺抽吸物,深部伤口抽吸物,窦内抽吸物,耻骨上穿刺液脓肿等)

可排除空气后直接注入厌氧瓶内。

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