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[转发]全自动加样系统和全自动酶标分析系统优化组合模式初探

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郑振寰 发表于 2006-3-3 10:40 | 显示全部楼层 |阅读模式

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全自动加样系统和全自动酶标分析系统优化组合模式初探
谭明科(郴州市中心血站,湖南郴州 423000)

在使用全自动加样系统和全自动酶标分析系统中,笔者探索出一种组合模式,使全自动加样系统和全自动酶标分析系统完善结合,使运行时达到省时省力的效果。简介如下:

1、 仪器 软件 试剂

1.1 仪器和软件 MicroLab STAR和MicroLab STAR用户软件2.0版本。24/20型FAME和FANE User Software Version 用户软件2.1版本由瑞士哈美顿公司提供.

1.2 试剂 厦门新创HBsAg、抗-HCV、抗-HIV试剂;北京万泰HBsAg、河南理利抗-HCV、抗-HIV试剂。

2、 STAR和FAME实验步骤的编制和设计

2.1 STAR实验步骤的编制和设计:进样→进板架→加新创抗-HCV稀释液→加理利抗-HCV稀释液→加理利抗-HIV稀释液→加样(初/复检6块板一次完成)→加质控品(设空白2孔,阴性3孔,阳性2孔,质控1孔)→创建条码文件。

2.1 FAME实验步骤的编制和设计:见表1

表1 :初、复检FAME实验步骤的编制和设计

新创

万泰

理利

HBsAg

抗HCV

抗HIV

HBsAg

抗HCV

抗HIV

准备板

时间(min)

2

2

2

2

2

孵育

温度(℃)

37±2

37±2

37±2

37±2

37±2

时间(min)

——

25±2

——

——

20±2

30±2

洗涤

板洗涤模式(遍)

5

6

6

浸泡时间(S)

20

20

20

加酶

量(50μL/孔)

50

100

50

50

100

100

孵育

温度(℃)

37±2

37±2

37±2

37±2

37±2

37±2

时间(min)

60±5

25±5

60±5

60±5

15±2

20±2

洗涤

板洗涤模式(遍)

5

5

5

5

6

6

浸泡时间 (S)

20

20

20

20

20

20

加底物

量(100μL/孔)

100

100

100

100

100

100

孵育

温度(℃)

37±2

37±2

37±2

37±2

37±2

37±2

时间(min)

15±2

10±2

15±2

10±2

10±2

10±2

加终止液

量(100μL/孔)

50

50

50

50

50

50

振荡

时间(S)

5

5

5

5

5

5

比色

测量波长(nm)

450

450

450

450

450

450

参考波长(nm)

620

620

620

620

620

620

3、 设备设置

3.1 STAR设备设置:高级选项RS232,加样通道8,采用纲针模式,24针交替进行。

3.2 FAME设备设置:装载模式设置为自动模式,时间安排模式设置为距前一板架20分钟和0分钟,分别用20min和0min表示。运行过程中由软件程序自动优化安排。

4、 FAME工作表的排列模式:用“1”表示初检厦门新创HBsAg、抗-HCV、抗-HIV试剂,用“2”表示复检万泰HBsAg、理利抗-HCV、抗-HIV试剂。

4.1 当1≤Sampler≤88时,有两种排列方式,见表2:

表2:当1≤Sampler≤88时的两种排列方式:

排列模式

运行时间

20min

0min

1 1 2

1h 43min

1h 49min

2 2 1

1h 47min

1h 42min

4.2 当88<Sampler≤176时的6种排列方式,见表3:

表3:当88<Sampler≤176时的6种排列方式

排列模式

运行时间

20min

0min

1 1 2 1 2

2h 39min

2h 59min

2 2 1 1 2

2h 31min

2h 25min

3 1 1 2 2

2h 35min

2h 53min

4 1 2 2 1

2h 47min

2h 58min

5 2 1 2 1

2h 25min

2h 56min

6 2 2 1 1

2h 55min

2h 50min

4.3 当176<Sampler≤264时,有20种排列方式,见表4。

表4:当176<Sampler≤264时的种排列方式

排列模式

运行时间

20min

0min

1 1 2 1 2 2 1

3h 46min

4h 26min

2 1 2 2 1 2 1

3h 35min

4h 06min

3 1 2 2 1 1 2

3h 38min

3h 37min

4 1 2 1 2 1 2

3h 47min

4h 03min

5 2 1 2 1 2 1

4h 39min

4h 06min

6 2 1 2 1 1 2

4h 02min

3h 45min

7 2 1 1 2 1 2

3h 51min

3h 26min

8 2 1 1 2 2 1

3h 53min

3h 28min

9 1 1 1 2 2 2

3h 57 min

3h 39min

10 1 1 2 2 2 1

3h 43 min

3h 50min

11 1 1 2 1 2 2

3h 35 min

3h 30min

12 1 1 2 2 1 2

3h 34min

3h 42min

13 1 2 1 1 2 2

3h 34min

4h 03min

14 1 2 2 2 1 1

3h 37min

3h 50min

15 2 2 2 1 1 1

3h 38min

3h 40min

16 2 1 2 2 1 1

3h 52 min

4h 35min

17 2 1 1 1 2 2

3h 36min

3h 34min

18 2 2 1 1 1 2

3h 30min

3h 57min

19 2 2 1 2 1 1

3h 32min

3h 44min

20 2 2 1 1 2 1

3h 46min

3h 39min

从表2、表3中可见,STAR加样速度一定,当1≤Sampler≤88时,FAME工作表的排列模式对FAME运行速度影响不大;当88<Sampler≤176时,FAME工作表的排列模式对FAME运行速度有一定的影响;当176<Sampler≤264时,FAME工作表的排列模式对FAME运行速度有较大影响,最快的FAME工作表的排列模式比最慢的FAME工作表的排列模式缩时近1/3(FAME最快运行速度为3h26min,最慢运行速度为4h39min);实验速度还取决于STAR的加样速度,我市无偿献血达100%,所以同一样本采用初、复检加样一次完成,其效率远大于初、复检分开加样。从表4不难看出,在实际能运行的8种模式中,以模式7或模式8同时设置距前一板架0min运行速度最快,效率最高。

5.2 是否距前一板架延迟20min,对FAME影响运行速度影响不一。当88<Sampler≤176时,应同时考虑第二架第一板与前一回最后一板的间隔时间,以加样时间略大于间隔时间为宜。当88<Sampler≤176,虽然表3中模式2和模式5均可达到最佳运行效果,但模式5第二架第一板与前一加最后一板的间隔时间不到20min,所以模式2为宜。实际上,当Sampler>176时,也只须考虑第二架第一板与第一架最后一板的间隔时间,因第二架第一与前一架最后一板的间隔时间远远大于加样时间。

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qisimengda 发表于 2006-11-19 14:57 | 显示全部楼层
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