[转发]酶联免疫反应加速仪在乙肝五项检测中的应用及推广

酶联免疫反应加速仪在乙肝五项检测中的应用及推广
李云庆1 　邢友忠2 　李红新3
1 (济南烟草职工医院,济南250100)
2 (济南市中心医院全福医院,济南250100)
3 (济钢三区医院,济南250100)
　　近期推出一种新型医疗器械———酶联免疫反应加速仪。此仪器可广泛应用于加速酶联免疫反应。它利用免疫反应中抗原、抗体结合部分形成互补、凹腔内氨基酸侧键的位置要有利于产生各种次级键同时有序施加的高频电磁波能促使离子迁移和偶极子转动引起免疫分子振转的原理,从而使酶联免疫反应时间由原来得几十分钟甚至数小时在十分钟内完
成,特作介绍。
1 　材料与方法
1. 1. 1 　酶联免疫反应试剂盒(以下简称试剂盒) :上海科华生物技术有限公司生产的科华牌“立可读”乙肝五项检测试剂盒。
1. 1. 2 　稀释用生理盐水
1. 2 　标本来源
HbsAg 纯品:卫生部临检中心提供。随机抽样血清:济南烟草职工医院和济南市中心医院全福医院43 份门诊血清。
1. 3 　仪器
高频免疫反应加速器(四川诺亚医疗科技公司) 、96 孔全自动酶标仪(LabsystemsMultiskan) 、37 ℃恒温水浴箱(苏州医疗仪器厂) 、微量振摇器(姜堰市电子仪器厂) 。另:50～100 微升加样枪数只。
1. 4 　方法
1. 4. 1 　使用上海科华生物技术有限公司生产的科华牌“立可读”乙肝五项检测试剂盒。具体操作方法接《全国临床检验操作规程》及试剂盒使用说明书进行。不同处为:使用高频免疫反应加速器(以下简称快速法) 第一步抚育7 分钟、第二步抚育3 分钟。使用37 ℃恒温水浴箱(以下简称传统法) 第一步抚育30 分钟、第二步抚育15 分钟。
1. 4. 2 　线性试验:
待测样本浓度为卫生部临捡中心提供高值Hb2sAg 纯品(大于10000ng/ ml) ,使用两种分别使用仪器后对HbsAg 测定线性结果比较。
含量 1/ 1000 5/ 1000 1/ 100 1/ 20 1/ 10 1/ 4 1/ 2 1
A1 0. 22 0. 42 0. 72 1. 90 2. 26 2. 60 3. 14 3. 14
A2 0. 24 0. 44 0. 83 2. 06 2. 27 3. 14 3. 14 3. 14
　　r1 = 0. 9976 ,线性范围10～500ng/ ml
　　r2 = 0. 9987 ,线性范围5～500ng/ ml
　　注:A1 :快速法检测后的吸光度　A2 :传统法检测后的吸光度
1. 4. 3 　重现性试验:
使用上海科华生物技术有限公司生产的科华牌“立可读”乙肝五项检测试剂盒,利用阳性对照血清及卫生部临检中心提供的HbsAg 质控血清进行批内及批间重现性比较,批内重现性及批间重现性重复次数均为14 次,批内重现性(n = 14) 。
样本编号 1 # 2 # 3 # 4 #
平均吸光度±S 2. 458 ±0. 14 0. 210 ±0. 021 1. 915 ±0. 18 0
RSD( %) 4. 24 9. 79 7. 76 0
　　注:1 # 、2 # 、3 # 均为HbsAg 阳性血清4 # 为正常人血清批间重
现性(n = 14)
样本 阳性对照 1ng/ ml 5ng/ ml 阴性样本
本法(A) 2. 49 ±0. 25 0. 204 ±0. 018 0. 74 ±0. 058 0. 00 ±0. 01
RSD( %) 9. 8 9. 1 6. 0 5 0
常规法(A) 2. 56 ±0. 30 0. 25 ±0. 012 0. 93 ±0. 058 0. 01 ±0. 017
RSD( %) 11. 61 7. 53 6. 18 173
1. 4. 4 　临界值试验
使用上海科华生物技术有限公司生产的科华牌“立可读”乙肝五项检测试剂盒分别对卫生部临检中心的提供的:HbsAg0. 5ng、HbsAb、HbeAg、HbeAb、HB2cAb 质控血清进行两种仪器实验,测试结果如下:
HbsAg(1ng) HbsAb(10miu) HbeAg(2ncu) HbeAb(4ncu) HBcAb(2ncu)
快速法 0. 13 0. 10 2. 25 0. 16 0. 02
传统法 0. 19 0. 14 2. 26 0. 19 0. 12
1. 4. 5 　临床验证
使用上海科华生物技术有限公司生产的科华牌
“立可读”乙肝五项检测试剂盒分别对43 份血清标本进行乙肝五项检测结果如下:
传统法 快速法 符合率( %)
HbsAg 阳性百分率( %) 20. 93 20. 93 100
HbsAb 阳性百分率( %) 36. 59 36. 59 100
HbeAg 阳性百分率( %) 4. 65 4. 65 100
HbeAb 阳性百分率( %) 44. 19 44. 19 100
HBcAb 阳性百分率( %) 41. 86 41. 86 100
　　(1) 表面抗原测试:传统法阳性数9 例,快速法阳性数9 例
　　(2) 表面抗体测试:传统法阳性数15 例,快速法阳性数15 例
　　(3) E 抗原测试:传统法阳性数2 例,快速法阳性数2 例
　　(4) E 抗体测试:传统法阳性数19 例,快速法阳性数19 例
　　(5) 核心抗体测试:传统法阳性数18 例,快速法阳性数18 例
结论:使用两种方法二者反应结果一致,而使用快速法的效率更高。
2 　讨　论
　　由上述实验结果可以看出,使用与酶联兔疫反应加速仪可比使用传统水浴箱大幅缩短乙肝五项的检验时间(由以前的45～90 分钟缩短为10 分钟) ,同时其线性更佳,特异性、灵敏度和重现性与传统方法相比无明显变化。比之目前较流行的乙肝五项快速检测试纸(金标法) 有更高的准确性和特异性。因此酶联免疫反应加速仪对临床正确、快速诊断有很大的积极的意义,值得在临床上推广。
参考文献
朱忠勇主编,实用医学检验学,北京:人民军医出版社。1992.