ABX五分类测定的相关说明
法国ABX诊断公司是全球五大血液分析仪制造商之一,自1992年推出首台五分类血细胞分析仪以来,创立了以经典细胞化学染色为核心技术的白细胞五分类的测定方法学。
其核心的组化染色方法是脂质染色法,是经典的血涂片的染色技术之一,同时为了实现在常规血细胞仪上快速测定的要求,经过大量的科研投入,发明了酶促染色技术,可以保证在非常短的时间内完成染色剂进入到细胞内部,对细胞核、颗粒及细胞膜进行特异性的染色过程。方法学的理论基础可参见美国临床病例杂志:
细胞化学染色技术请参阅Lawrence Kass M.D.Staining of Granulocytic Cells by Chlorazol Black E
0002-9173/81/1200/0810-0812;American Society of Clincial Pathologists.
ABX不断的改进五分类方法学,经过10多年的发展,推出了5个系列不同档次的五分类的血细胞分析仪(包括血液分析仪流水线)。在1995年ABX发明了DHSS(双鞘流技术),近一步推进流式细胞仪的鞘流技术在血液分析仪中的应用。因为在当前的仪器中只有ABX采用了2个鞘流依次测定白细胞的检测技术,也是ABX的技术创新。(参见《现代血液分析技术及临床》)。大大提高了仪器的检测精度,同时也能够测定2群异常白细胞的功能,提高了仪器的筛选率。
广大用户在购买五分类仪器的时候,对五分类测定方法学的困惑,我提出我个人的一些观点仅供参考。
1、当前的五家最大的血液分析仪制造商,他们采用的方法学是完全不同的,大体分为物理法和化学法两类,在当前看来,化学法是未来的发展的方向。因为白细胞分类的参考方法,是玻片染色技术。但是每家公司在设计方法学的时候,都会考虑到每种细胞的分群规则,所以每种方法学都有特点,不能只从理论上说那种更好,最终是要看更能够体现分类的准确性和重复性。
2、关于光源的问题:当前的血细胞分析仪的光源包括:离子气体激光(氩离子激光)和固体激光(半导体激光)和卤素灯光源。在白细胞分类方法学上,没有任何的专家和权威机构指出,必须用激光分析五分类。因为各家的方法学是不同的,设计也不同。其中激光是单色光源,而卤素灯是多色光源(白光)。这两种光源的本质区别决定了其用途,当采用散射技术时应采用激光光源。ABX 采用的是细胞染色技术。大家都了解,我们如果用红光或绿光在显微镜下观察玻片,是不能够有效观察细胞形态的。因为所有的显微镜都是采用白光(卤素灯)作为光源的。因为只有白光才能有很好的穿透力和显示不同细胞的染色情况。所以ABX采用高能卤素灯,经自动能量校正系统,准确且稳定的识别细胞的染色情况。此种方法是对白细胞的综合分析。
3、方法学的先进性:当前的五分类仪器必须具备幼稚细胞的测定功能,因为ABX采用了先进的染色系统和细胞染色液(氯唑黑E),能够在同一个双鞘流通道中分析出,LIC(巨大未成熟粒细胞)和ALY(不典型淋巴细胞),对白细胞的筛查能力大大提高,而Sysmes XT-1800!只能识别一种幼稚细胞(IG)。
4、关于化学染色和荧光染色,众所周知,细胞分析的参考方法为玻片的化学染色技术,其中ABX采用了脂质染色技术,而荧光染色技术应用到五分类技术是Sysmex 在XE-2100仪器上首先提出的,染色的主要用途是增强对某群细胞的分析能力,当前还不能成为分类的参考方法。另外荧光染色技术一般应用在网织红细胞的分析技术,ABX retic 采用了噻唑橙荧光染色技术分析网织红细胞。
5、ABX的方法学得到了血液学界的广泛认可,其中Beckman Coulter 公司也购买了ABX的核心分类技术,进行相关产品的研发,如Couter AC*T5diff等。另外,国内权威专著《现代血液分析技术与临床》丛玉隆主任著,也对ABX五分类技术进行了详尽的介绍和认可。
当前,用户更多的是在谈论方法学的问题,其实每家著名厂家的产品都是具有一定的可比性的、国际权威杂志的评估报告及相关的证件(美国FDA认证、CE认证、ISO9001)。我们建议用户应更多关注仪器的其他问题,如
a\末梢血的测定能力问题也是比较实际的问题,尤其是儿童和门诊病人
b\样品量,有效地减少实际的消耗量
c\检测异常细胞能力
d\急诊测定能力及快速反应时间
e\仪器操作的方便灵活
f\样品的混匀能力和自动进样能力(包括装载能力)
h\仪器价格和性能的综合评估 |