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[分享] 生化检验中的各种空白概念

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w金泽 发表于 2018-10-25 23:42 | 显示全部楼层 |阅读模式

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对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论 坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充:

空白概念区别要点:**空白=只含**的空白(吸光度)

1、试剂空白:

    由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所以从理论上说,所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除。试剂本身的吸光度就是 试剂空白。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量。

    在传统手工方法中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、空白管。其中空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白。因为 操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白。

    在全自动分析仪上,大体上是模拟手工操作。但许多全自动分析仪为追求速度,在设计上采用一些折中方法来测定试剂空白。以日立全系 列生化仪为例。该系列分析仪是做不了实时试剂空白,因为它们全是先加入样本后加试剂,为了折中,只好在定标时做一个试剂空白,保 存起来,需要扣除试剂空白时再减这个预先保存的值。这种做法,对于比较稳定的试剂来讲,对结果影响不大。

     通俗的讲,日立的仪器工作流程中首先是将标本加入到比色杯中,然后依次加入R1试剂、R2试剂,所以试剂空白在每个测定项目曲线 中是无法看到的。但是7170从CALIBRATION中是可以看到的,S1ABS就是代表试剂空白吸光度,在CALIBRAT ION画面里的下方找到Reaction Monitor(反应监察),其中STD(1)就是代表试剂空白反应曲线.为了减小误差,日立仪器会连续做两次测定,所以你看到 FIRST和SECOND两条,计算时是取他们的平均值。做试剂空白目的之一就是观察试剂是否稳定,积极采取措施纠正。对于日立 的这种试剂空白测定很多仪器都采用这种方法,也叫做试剂空白校准。

    总的说来,自动生化仪上的试剂空白一般表现为零点吸光度,该吸光度是通过校准确立的。

2、样本空白:

    由于溶血、脂血、黄疸等情况,会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。所以对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可以去除这 方面的影响。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。自动生化仪上,很难界定样本空白。 与消除样本空白有关的大约有如下几点:

    a).在双试剂测定时,加入试剂1和样品后的吸光度可一定程度上扣除样本空白,所以有单试剂不能扣除样本空白的说法。
    b).现在优质的试剂的抗干扰能力都比较强,比如有些双试剂,R1加入后先和样本孵育一段时间,将血红蛋白、脂肪、胆红素等反应 掉,再加入R2开始测定反应。在一定范围内都可以消除样本空白。

    c).现代全自动生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则是根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征,选择两个波长和 ,使干扰组分在这两个波长处的吸光系数相等,而使待测物质在两波长处的吸光系数有显著差别。以两波长分别测定分析溶液的吸光度, 以两个吸光度值之差(△A)计算。这也可以扣除一部分样本空白.

    d).有些仪器,例如日立系列,有专门的“血清信息”功能的设置。做法都是单 独占用一个空白通道来计算,这也叫做样品空白校准。

3、水空白:

    比色杯在加入水以后的吸光度。水空白的意义主要是对光路系统进行检查和校正,如光源,比色杯等,同时在计算中起到消除“杯差”的 作用。日立7060中的Cell Blank(杯空白)测定的就是水空白。


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 楼主| w金泽 发表于 2018-10-26 13:25 | 显示全部楼层
内容还可以,大家可以看看!后续会发更多相关内容.
 楼主| w金泽 发表于 2018-10-28 00:05 | 显示全部楼层
121121 发表于 2018-10-29 10:03 | 显示全部楼层
新手,学习了
2567 发表于 2018-10-30 09:25 | 显示全部楼层
学习学习
googzj_feng 发表于 2018-10-30 17:14 | 显示全部楼层
学习了
wd601524684 发表于 2018-10-30 20:38 | 显示全部楼层
学习了,谢谢
SixGod 发表于 2018-10-30 23:51 | 显示全部楼层
万分感谢
张1 发表于 2018-10-31 09:20 | 显示全部楼层
学习学习
tang2018 发表于 2018-11-8 12:02 | 显示全部楼层
刚好提高一下
杨永刚 发表于 2018-12-26 10:00 | 显示全部楼层
谢谢无私分享
tgb7777777 发表于 2018-12-26 13:08 | 显示全部楼层
老师 : au5800 有样本空白概念里有十个通道  是不是就是设定一个水当做试剂项目关联好相关测试项目,实验时会做俩个反应杯实验加两次样本一个显色一个空白?

那迈瑞里的参数有样本空白选项是不是一个处理方法只是不用占用试剂位(水从针里加了)

是不是这样
tgb7777777 发表于 2018-12-26 13:13 | 显示全部楼层
老师 au5800 里的十个样本空白通道 是不是就是专门设定一个水试剂项目 放好试剂关联好测试项目 测试的时候加样本加两次 一个显色一个空白?
迈瑞参数里也有样本空白选项是不是一个概念 只不过不用关联和占用通道水从针里出
关于样本空白是不是这样啊
张刘 发表于 2018-12-26 14:11 | 显示全部楼层
学习了,好文,谢谢分享
906452082 发表于 2019-1-1 20:21 | 显示全部楼层
学习学习
kjack17 发表于 2020-6-25 21:46 | 显示全部楼层
谢谢无私分享
ycfun 发表于 2020-8-18 09:58 | 显示全部楼层
学习了,谢谢
迷失忘我 发表于 2021-6-28 13:46 | 显示全部楼层
谢谢分享
ChenGY 发表于 2023-5-19 07:09 | 显示全部楼层
感谢
ILUAY7 发表于 2023-12-5 16:12 | 显示全部楼层
学习了,谢谢
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