[转发]XL系列流式细胞仪的原理及常见故障维修

李培援，唐国山
(广西医科大学第一附属医院设备科，广西南宁530027)
随着免疫学和细胞化学，单克隆抗体等技术的发展，流式 细胞一个接一个的通过。下面就通过实例来讲述一些故障处理
细胞仪在许多大中型医院及科研单位 得到了广泛的应用。得到准确的测量结果，对于流式细胞仪的维护保养就显得尤其 重要。下面，对XL系列流式细胞仪的原理进行分析，并介绍一些常见故障的维修。
流式细胞仪的方法学一流式细胞术(Flow CYtOmetrv，FC M)，是利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理、化及生物学特性进行分析的方法。它集巾了单克隆抗体技术、激光技术、计算机技术、细胞化学和免疫化学技术，利用流式细胞仪对细胞等牛物粒子的理、化及生物特性(细胞大小、DNA含量、细胞表面抗原袁达等)进行定量、快速、客舰、多参数相关的检测。x L型流式细胞仪的工作原理为：当细胞或生物粒子通过激光检测 时，存激光的照射下产生散射光(前向散射FS和侧向散射ss)及荧光。光电池、光电二极管以及光电倍增管(PM T)将光信号转变为电信号，电路对信号进行放大和模数转换(A／D)，再将数宁信号输入计算机进行分析并形成各种图像信号，即是我们所需要的结果检测数据。
流式细胞仪的组成：①主机(CvtOmeter)一负责完成样本吸入分析并采集相应的信号、鞘液和清沽液的供给、二个散射光和四个荧光信号的检测。②工作站(Workstation)一负责控制主机的所有工作，并将主机采集到的电信号进行分析，得出结果和相关信息。③ 电源箱(Pow rr SUPPIY)一对主机提供电源(+5V，4-15V，4-24V)、系统所 ^ 0 lL负压力、收集废液。另外，还有激光的电源模块。
由细胞仪的原理町知，仪器是用鞘液将样本包裹成单个细胞，通过激光照射区一流动池，产，}三散射光和荧光。所以，要求仪器一定要有一个稳定的压 和鞘流环境，才能使细胞列队一个一个地通过；还要求激光光斑能准确地照在流动池内流过的细胞上。
最容易出问题的地方就是：①激光是否准确地对准流动池内流过的细胞的中心。② 能否保证 力稳定使鞘液稳定地包裹
细胞一个接一个的通过。下面就通过实例来讲述一些故障处理方法：
故障1仪器的光路很散，所有线性信号HPCV>2。
首先需要做的就足排气泡，清除鞘液内的气泡米改善鞘液的包裹的稳定性 按仪器面板l：的Prime按键，并按下鞘液箱过滤器的排气按钮，仪器就会r』动地将鞘液箱到Flowcell之间管道的气泡排掉，以确保样本的包裹稳定。如果这样还是无法改善光路情况，那么就需要调节激光的光束整形器的位置，让激光能以最佳角度和最小光点照射在样本微粒l (一个一个的带荧光的粒子)，使各线性信号的HPC V<2。
故障2 真空报警(Vacuum C hamher Error)，仪器不能进样。
仪器的真空瓶足仪器正压和负压切换的中心，当真窄瓶内的液体达到瓶内感应器的位置时就会出现真窄报警故障。该故
障产生的原因是废液不能通畅排放。只要：①解决好VL7以及CV3的通畅 题，保证vL7 管阀工作正常、CV3单向导通。保证正鱼 的止常切换，当排废液时真空瓶须加入正压(vL11耍加电打开)。另外，还有町能足液面水平传感器自身损坏导致误报警，这种情况，若没有好的传感器，可以暂时断开感应器，仪器也可以正常工作。
故障3鞘液 力报警(Shcath Pressu re E rro r)。现象为：样品管被样品台抬起，样品快速减少，主机卜的信号指示二极管时有时无的闪烁，l 且在短时问内样品台自动降下。
可能原因有：①鞘液箱或清汕液箱盖未拧紧， 致压力泄漏，重新拧紧即可。②鞘液过滤器堵塞，更换过滤器即可。
③压力调 漂移，导敛鞘液压力偏低，可调节此阀，使Stlealh Pressure为4PSI。
总之，维修此仪器的关键是，在熟悉其工作原理的基础上，针对故障现象。仔细观察机器检测过程中的状况，特别足水路、气路压力，同时要充分利川维修菜单的各项检测功能，能很快地找出故障原凶，并解决问题。