贝克曼库尔特Ac*T diff 2分析仪临床应用手册[转帖]

目录 第一部分 Ac*T diff2血细胞分析仪工作原理简介 一、库尔特原理 二、库尔特专利技术 第二部分 血细胞直方图介绍 一、直方图的导出 二、白细胞直方图 三、红细胞直方图 四、血小板直方图 第三部分 检测参数介绍 一、白细胞系列参数 二、红细胞系列参数 三、血小板系列参数 第四部分 常见的旗标及其临床意义 一、旗标类型 二、常见旗标的临床意义 第一部分 Ac*T diff2血细胞分析仪工作原理简介 Ac*T diff2是贝克曼库尔特公司推出的最新款三分类血液分析仪，检测速度为60样本/小时，能报告18个临床参数及3个血细胞直方图。 该仪器的检测原理包括： 1． 库尔特原理 — 用以检测细胞数量和体积，同时构筑细胞体积分布直方图； 2． 单色光比色原理 — 用以检测血红蛋白。 Ac*T diff2血液分析仪吸入的样本将被分成两部分稀释，一部份送到红细胞计数池进行红细胞和血小板计数；另一部份在完成红细胞的溶解和血红蛋白的转化后在白细胞计数池进行白细胞计数和血红蛋白测定。红细胞、血小板和白细胞都是根据库尔特原理计数得来；血红蛋白是利用分光光度计比色得到；白细胞的三分类根据白细胞体积分布直方图得来。 一、库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。其内容为：血细胞是电的不良导体，当一个细胞通过计数小孔时，会导致小孔两端电阻的瞬间变化，将其转化成脉冲，感应器通过检测脉冲的数量及大小，从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。 如图1：细胞计数池中，小孔内外两个电极和稀释液构成一个电流回路，在负压的作用下，细胞依次通过小孔，电极能感应到一个瞬间的电阻变化，并将其转换成脉冲，脉冲的数量代表细胞的数量，脉冲的大小反映细胞的体积大小。 利用库尔特原理，能够对白细胞进行计数并根据体积分布进行三个亚群的分类；对红细胞和血小板根据体积进行区分并分别计数。 图1 库尔特原理示意图 二、库尔特专利技术 1．脉冲编辑 当细胞从小孔中央通过时，将得到一个规则的脉冲，反之将得到不规则的脉冲，不规则脉冲的机率可以根据细胞浓度和小孔的面积进行推算，在这种情况下仪器将删除不规则脉冲，并进行校正。 2． 重叠校正 当两个或两个以上的细胞重叠在一起，同时通过计数孔时，将只有1个脉冲被检测到，这样会导致细胞数假性下降，体积数假性上升，这种重叠的机率可以根据细胞浓度、小孔的面积及流速进行推算，仪器本身能将这种重叠进行校正。 3．三次计数和延长计数： 在库尔特血液分析仪上，每一个样本都要进行三次计数，结果取三次计数的平均值。如果三次结果统一，结果将取平均值；如果有一次结果不好，结果将取另外两次计数的平均值并标以旗标；如果三次结果均不统一，仪器将不给出数值，结果以“------”代码替代。 在计数的同时，感应器将检测通过的细胞数量是否足够进行直方图分析，并将自动延长少于界定数量标本的计数时间，以保证达到一定的统计数量，减少统计学误差。 4．扫流技术 由于红细胞和血小板在同一个计数池，红细胞在经过小孔后，可能发生回流，触及小孔感应区，电极就会感应到一个微弱的脉冲，而将其计成血小板，导致血小板数量假性上升。为了防止这种干扰，库尔特运用扫流技术，在小孔后侧安装一个液流装置，及时将通过小孔的红细胞冲走，消除回流对血小板的干扰。 5．血小板拟合技术 血小板的体积范围在0fl～70fl，在实际计数中，为了排除2fl以下电子背景和杂质的干扰，以及20fl以上小红细胞和其他细胞的干扰，根据血小板的对数正态分布理论，在红细胞/血小板计数池中只计数2fl～20fl的血小板，用电子拟合曲线拟合出0fl～70fl范围的血小板数量。通过拟合可以有效排除干扰，使结果更准确。 第二部分 血细胞直方图介绍 一、直方图的导出 在细胞通过小孔计数时，感应器收集脉冲的大小及数量，转换为相应的细胞体积和数量，将体积为横坐标，以细胞的相对数量为纵坐标，就得到某一种细胞的体积分布直方图。血细胞直方图通常有三种：白细胞直方图、红细胞直方图和血小板直方图。 二、白细胞直方图 进入白细胞计数池的样本要经过溶血剂处理，这时红细胞快速溶解，白细胞失水皱缩，皱缩后的白细胞形成体积差异明显的三个亚群，在直方图上表现为三个峰区，根据直方图在不同体积段三个峰区的比例，决定白细胞三个亚群的百分比。图2为典型的白细胞直方图。 该直方图体积分布范围在30～450fL，大于35fL的颗粒被计数为白细胞，30～35fL用于观察异常细胞群和细胞碎片。从白细胞直方图上，可以明显地看到三个细胞分布区：最左边又高又陡的峰，跨度35～90fL，是淋巴细胞峰，以成熟淋巴细胞为主；最右边又低又宽的峰，跨度160～450fL，是粒细胞峰，以中性粒细胞为主；两峰之间的平台地带，从90～160fL，是单个核细胞细胞区，以单核细胞为主。 直方图上有四个区域，大约在35fL、90fL、160fL、450fL的位置，分别标记为1、2、3、4，如果这些区域的细胞分布出现异常，将引发报警。 三、红细胞直方图 图3是典型的红细胞直方图，体积分布从24～360fL，仪器将大于36 fL的颗粒计为红细胞，24～36 fL用以观察是否有36 fL以下的小红细胞被漏计。 从典型的红细胞直方图上，可以看到两个细胞群体： 1． 细胞主群 从50 fL开始，两侧对称呈正态分布的曲线，又称“主峰”； 2．大细胞群 在主群右侧，又称“足趾部”，是一些红细胞二聚体、三聚体、多聚体的混合物。 四、血小板直方图 图4是典型的血小板直方图，它通常包括两条曲线：一条是2～20 fL的原始数据曲线；另一条是0～70 fL的电子拟合曲线。仪器根据测量得到的2～20 fL范围内血小板分布情况，按照对数正态分布规律得到0～70 fL范围血小板分布情况。如果拟合成功，血小板数量由拟合曲线下的面积测得，即0～70 fL范围的血小板数量；如果拟合不成功，没有拟合曲线，血小板结果只报告2～20fL范围的血小板数量。 血小板曲线不拟合的原因有： 1．直接计数的血小板颗粒数< 20×109/L； 2． 血小板不呈现对数正态分布； 3． 血小板平均体积不在3～15fL之间； 4． 血小板分布宽度> 20% 第三部分 检测参数介绍 一、白细胞系列参数 1．WBC 中文名称：白细胞 正常参考范围：4.0～10.0 ×109/L 2．GR% 中文名称：粒细胞百分比，即白细胞通过三分类得到的粒细胞部分占所有白细胞的百分比。 正常参考范围：50%～70% 3．GR# 中文名称：粒细胞绝对值 正常参考范围：2.0～7.0 ×109/L 4．MO% 中文名称：单个核细胞百分比，即白细胞通过三分类得到的单个核细胞部分占所有白细胞的百分比。 正常参考范围：3%～8% 5．MO# 中文名称：单个核细胞绝对值 正常参考范围：0.12～0.8 ×109/L 6．LY% 中文名称：淋巴细胞百分比，即白细胞通过三分类得到的淋巴细胞部分占所有白细胞的百分比。 正常参考范围：20%～40% 7．LY# 中文名称：淋巴细胞绝对值 正常参考范围：0.8～4.0 ×109/L 二、红细胞系列参数 1．RBC 中文名称：红细胞 正常参考范围：男性 — 4.0～5.5 ×1012/L 女性 — 3.5～5.0 ×1012/L 2．Hgb 中文名称：血红蛋白 正常参考范围：110～160g/L 3．Hct 中文名称：红细胞比积，即将EDTA抗凝血在一定条件下离心沉淀，测出红细胞在全血中占体积的比例。 在Act diff2仪器上为计算参数，计算公式为： Hct = （RBC×MCV）/1L 正常参考范围：0.35～0.50 4．MCV 中文名称：平均红细胞体积 正常参考范围：80～100 fL 5．MCH 中文名称：平均红细胞血红蛋白含量 在Act diff2仪器上为计算参数，计算公式为： MCH = Hgb / RBC 正常参考范围：27～34 pg 6．MCHC 中文名称：平均红细胞血红蛋白浓度 在Act diff2仪器上为计算参数，计算公式为： MCHC = Hgb / Hct 正常参考范围：320～360 g/L 7．RDW 中文名称：红细胞分布宽度，是反应红细胞体积大小一致性的参数，其值越大，反应红细胞大小越不一致。 正常参考范围：11.5%～15% 三、血小板系列参数 1．PLT 中文名称：血小板 正常参考范围：100～300 ×109/L 2．MPV 中文名称：平均血小板体积 正常参考范围：6.5～12 fL 3．Pct 中文名称：血小板比积, 即血小板在全血中占体积的比例。 正常参考范围：0.108%～0.272% 4．PDW 中文名称：血小板分布宽度，是反应血小板体积大小一致性的参数，其值越大，反应红细胞大小越不一致。 正常参考范围：11.5%～18% 第四部 常见的旗标及其临床意义 一、旗标类型－有两种类型的旗标： 1.替代性旗标(代码) 结果不显示，而以代码替代，主要有 “-----”、“+++++”、“XXXXX”、“……”等。 2.非替代性旗标 出现在参数后面，主要有“×”、“+”、“*”、“1”、“2”、“3”、“4”、“M”(代表多个区域)、“H”、“L”等。 二、旗标及代码的临床意义 1.“-----”(虚线) 表示三次计数结果不统一。 如果WBC参数后出现该旗标，则参数LY#、MO#、GR#后也将出现“-----”旗标，而参数LY%、MO%、GR%后将出现“*”旗标； 如果RBC参数后出现该旗标，则参数Hct、MCH、MCHC后将出现“……”旗标，而参数MCV、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标； 如果参数MCV后出现该旗标，则参数Hct和MCHC后将出现“……”旗标，而参数RDW后将出现“*”旗标； 如果参数PLT后出现该旗标，则参数MPV(PCT和PDW)后将出现“……”旗标； 如果参数MPV后出现该旗标，则参数PLT(PCT和PDW)后将出现“*”旗标； 如果参数PDW后出现该旗标，则参数PLT、MPV(及PCT)后将出现“*”旗标。 2.“+++++” 表示结果超出仪器的操作范围。 如果参数WBC后出现该旗标，则参数LY#、MO#、GR#、LY%、MO%、GR%后将出现“……”旗标，而参数RBC、HGB、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标； 如果参数RBC后出现该旗标，则参数MCV、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标，而参数MCH和MCHC后将出现“……”旗标； 如果参数HGB后出现该旗标，则参数MCV和MCHC后将出现“……”旗标； 如果参数PLT后出现该旗标，则参数MPV(PCT和PDW)后将出现“……”旗标，而参数WBC、LY#、MO#、GR#、HGB、MCH和MCHC后将出现“*”旗标。 另外，当参数MCV<50fL或>130fL时，该参数后也会出现该旗标。这时参数RBC、MCH、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标，而参数Hct和MCHC后将出现“……”旗标。 3.“XXXXX” 表示计数小孔阻塞报警。 如果阻塞发生在白细胞计数小孔，WBC参数及其分类参数的百分比和绝对值将出现“XXXXX”旗标； 如果发生在红细胞/血小板计数小孔，参数RBC、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“XXXXX”旗标。 4.“……” 表示计数不完全，系统缺乏足够的数据，结果无法计算。是从三次计数不统一的参数中衍生得到的。 如果分类参数LY#、MO#、GR#、LY%、MO%、GR%后出现该旗标，引起的原因有：WBC<1.0×109/L或>99.9×109/L；参数LY#、MO#、GR#三次计数不统一；结果无法计算。 如果参数HGB计算时发现错误，HGB后将出现该旗标，而参数MCH和MCHC后也将出现该旗标。 如果参数Hct、MCH和MCHC后出现该旗标，引起的原因有：RBC三次计数不统一；参数RBC、HGB、MCV的结果超过操作范围；HGB结果不完整(错误)。 如果参数MPV(PCT和PDW)后出现该旗标，引起的原因有：PLT三次计数不统一；PLT结果超过操作范围。 如果参数Hct和MCHC后出现该旗标，说明MCV三次计数不统一。 5.“+” 表示结果超出线性范围，但小于操作范围。 99.9×109/L > WBC <150×109/L； 7.00×1012/L > RBC <8.00×1012/L； 250g/L > HGB <300g/L； 999×109/L > PLT <3000×109/L。 如果参数WBC后出现该旗标，则参数RBC、HGB、MCV、Hct、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标，而参数LY#、MO#、GR#、LY%、MO%、GR%后将出现“……”旗标； 如果参数RBC后出现该旗标，则参数Hct、MCH、MCHC、MCV、RDW、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标； 如果参数HGB后出现该旗标，则参数MCH和MCHC后将出现“*”旗标。 如果参数PLT后出现该旗标，则参数MPV(PCT和PDW)、WBC、LY#、MO#、GR#、HGB、MCH、MCHC后将出现“*”旗标； 6.“1”、“2”、“3”、“4”、“M”(针对白细胞分类参数) 说明白细胞分类参数在一个特定区域(1、2、3、4)或多个区域(M)没有达到体积分布标准(分类比例异常或出现异常细胞)。 7.“H” 说明样本分析结果(或质控结果)超过参考范围上限。 8.“L” 说明样本分析结果(或质控结果)低于参考范围下限。 9.“X” 表示计数小孔部分报警，提示结果需复核。 10.“*” 表示检测或计算过程受到影响。通常出现在受“-----”、“+”、“+++++”等旗标影响的参数后。 如果(HGB×3×100)/Hct的结果小于0.8或大于1.2，说明样本处理有问题，这时参数RBC、HGB、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT、MPV(PCT和PDW)后将出现“*”旗标； 如果该旗标只出现在参数RDW后，说明RBC直方图不对称，可能存在双峰； 如果只出现在WBC参数后，说明白细胞计数在35fL处受干扰； 如果只出现在参数PLT、MPV(PCT和PDW)后，可能是PLT<20×109/L、三次计数不统一、PLT分布异常(MPV<3fL或>15fL)、PDW>20或扫流错误； 如果参数MCHC<250.0g/L或>40.0g/L，说明有样本干扰或仪器问题，这时参数RBC、HGB、MCH、MCHC后将出现“*”旗标。

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