丁红辉
【摘要】目的 比较干化学试纸法与全自动生化分析仪酶法检测各项生化项目的相关性。方法 对干化学试纸法和全自动生化分析仪酶法检测血糖、肌酐、尿素、a2淀粉酶的结果进行比较分析。结果 干化学试纸法与全自动生化分析仪酶法各项血生化项目检测结果有高度正相关性( r > 01975) , 无显著性差别( P >0105) , 且批内变异系数小于5 % , 精密度高。结论 干化学试纸法具有准确、快速、重复性好、可用全血进行检测、无需定标及试纸易保存等优点, 适用于临床实验诊断中心(检验科) 急诊化验室急诊生化项目的检测。
【关键词】干化学试纸法; 酶法; 血生化项目; 对比分析
中图分类号: R446111 + 2 文献标识码: A 文章编号: 100720931 (2005) 0320014202
A Comparative Study on the Detection of Blood Biochemical Item by the Method of Dry Reagent
Chemistry and Full2automatic Enzyme
DING Hong2hui . ( Department of Clinical Laboratory , Yiwu women and children’s Hospital , Yiwu , 322000 , Zhejiang ,
China)
【Abstract】Objective To compare the two methods of dry reagent chemistry and full2automatic enzyme to detection for blood biochemical item. Methods The detection of glucose , creatinine , urea and a2Amylase by the method of dry reagent chemistry and full2automatic enzyme were analyzed. Results The correlation of four biochemical items detected by two methods was higher than 01975. The precision was good with the coefficient variation below 5 %. Conclusions Dry reagent Chemistry method is rapid and accurate for offering experimental reference to emergent detection of blood biochemical item in clinical laboratory.
【Key words】Dry reagent chemistry method ; Enzyme method ; Blood biochemical item; comparison
作者单位: 义乌市妇幼保健院, 浙江 义乌 322000
干化学又称为固相化学, 是将一项测定中所需的全部或部份试剂预固定在载体中, 根据Kubelka - Munk 理论, 其反射率(R) 和固相层的厚度(X) , 单位厚度的光吸收系数(K) 及固相反应层的散射系数(S) 有关, 当K和S 固定时, R 仅同K有关, 而K的大小同待测物的浓度成正比,用反射光度计检测R 的大小, 可计算出待测物的浓度[1 ] 。
因急诊生化检验工作量大, 我院检验科添置了瑞士Roche公司产Reflotron Òsprint 全血干式生化分析仪, 这是一种适用干大中型现代化医院急诊实验室的诊断仪器, 能即时测定17 种临床测试项目(AKP、AMY, BIL、CH、CK、CREA、GGT、GIU、GOT、GPT、HDL-C、HGB、K+ 、P-AMY, TG、UREA、UA) , 有三个独立的检测单位能同时工作, 2～3 分钟内可得到3 个不同的检测结果, 操作简易, 样本可以是全血、血浆或血清, 无需预热试剂, 3 个简单步骤即可得出结果, 无需定标, 试纸条有效期长、易保存(部分可室温保存) 。因其体积小, 占用空间不大, 适用于临床实验诊断中心(检验科) 急诊化验室生化项目的检测。
为了保证检验结果的可靠性, 我们用Reflotron Òsprint全血干式生化分析仪和TOSHIBA 40FR 全自动生化分析仪对急诊生化检验中最常用的检测项目Glu、Cr、Urea、a-Amy进行检测, 对检测结果的相关性、重复性、精密度进行对比分析, 结果如下。
材料与方法
1 仪器和试剂 (1) 瑞士Roche 公司Reflotron Òsprint 全血干式生化分析仪及其干化学法血糖(Glu) 、肌酐(Cr) 、尿素(Urea) 、a2淀粉酶(a-Amy) 测定试纸条; (2) 日本东芝公司产TOSHIBA 40FR 全自动生化分析仪。Glu 和Urea 测定采用上海复星长征产液体试剂盒, Cr 和a2Amy 测定采用温州东瓯生物工程有限公司所产液体试剂盒。Glu 以试剂盒自带标准液定标校准; Cr、a2Amy 以英国RANDOX CalibrationCAL 2350 (Lot 235UN/ 1) 、Urea 用CAL 2351 (Lot 160UE) 定标校准。
2 标本来源 门诊及住院病人100 例, 其中男性52 例, 女性48 例; 年龄35～75 岁, 平均(5316 ±211) 岁。标本为检验科门诊空腹抽血标本及病房送检生化检验标本, 待血液凝固后分离血清分别进行GLU、Cr、Urea、a-Amy 的干化学试纸法和全自动生化分析仪酶法检测。用BECKMAN 未定值人血基质质控血清Level 1 (批号: M204241) 、Level 3 (批号: M204243) 分别在二台仪器上各进行10 批次检测。
3 检测方法 (1) 干化学法: 直接加定量血清32ul 干试纸条上, 待完全渗透后即在Reflotron Òsprint 全血干式生化分析仪进行检测。(2) 酶法: 血糖采用葡萄糖氧化酶法(GOD2POD) 、尿素采用尿素酶( 尿素酶—谷氨酸脱氢酶GLDH) 法、肌酐采用肌氨酸氧化酶法、a2淀粉酶采用对硝基苯麦芽庚糖苷( 4NP2G7 ) 法[2 ] 检测。用RANDOXCalibration CAL2350 (Lot : 235UN/ l) 、CAL2351 (Lot : 160UE)标准液和血糖标准液定标校准后, 进行检测, 分析上述4个项目在2 台仪器上检测结果有无显著性差异。(3) 批内精密度试验: 用BECKMAN 未定值人血基质质控血清level 1(批号: M204241) 、level 3 (批号: M204243) 分别在2 台仪器上进行10 批次检测, 计算批内精密度(CV %值) 。
4 统计方法 配对t 检验和直线回归与相关分析, 统计软件采用SPSS 1110。
结 果
1 对比实验 在Roche Reflotron Òsprint 干式生化分析仪和TOSHIBA 40FR 生化分析仪上同时对100 例急诊生化标本进行Clu、Cr、Urea、a2Amy 检测分析, 检测结果分析, 4 个项目各项检测结果在2 台仪器上相关系数r 分别为01982、
01991、01987、01992 , 均> 01975 , 且差异无显著性( P >0105) 。
2 精密度实验 用RANDOX level 1 和level 3 校准血清各10份分别做批内精密度试验, 实验结果见表1。Roche eflotron
Òsprint 干式生化分析仪和TOSHIBA 40FR 生化分析仪各项目检测结果的精密度CV 值在0185 %～4192 %间, 精密度良
好, 重复性也较好。
讨 论
100 例病人生化标本用干生化试纸法和全自动生化分析仪酶法检测Glu、Cr、Urea、a-Amy , 各项目的相关系数r 均> 01975 ; 两种方法对各项目检测值的配对t 检验P > 0105 ,表明Roche ReflotronÒsprint 干式生化分析仪和TOSHIBA 40FR生化分析仪检测结果有很高的相关性, 检测结果无显著性差异, 显示Reflotron Òsprint 干式生化分析仪(干生化试纸
法) 在敏感性、特异性方面均符合要求。
用BECKMAN 未定值人血基质质控血清level 1 ( lot :M204241) level 3 ( lot : M204243) 对Glu、Cr、Urea、a2Amy在Roche ReflotronÒsprint 全血干式生化分析仪(干化学试纸法) 和TOSHIBA 40FR 生化分析仪(酶法) 上各进行10 批次的测定结果分析表明, 各仪器各项目检测结果稳定, 精密度(CV 值) 1156 %～4156 %之间, 仪器的稳定性、重复性良好。而且我们在测定分析中发现, 大部分项目测定Reflotron Òsprint 全血干式生化分析仪在批内精密度、重复性方面比TOSHIBA 40FR 生化分析仪上要好。
1985 年开发的干化学多层膜试纸, 使其定量分析水平达到或接近常规湿化学法的水平[3 ] 。多层膜试纸其独特的优点是采用多层膜技术, 不仅能掩盖待测物的有色物质并提供背景, 选择性地阻留或去除的干扰物质, 而且还将等同于湿化学反应原理的各种物理、化学反应在各分层中进行, 使某一层中的产物可进入另一层中进行反应, 从而引导反应序列, 其各层可以给出特定的环境用以控制反应序列和反应时间[4 ] 。随着多学科高新技术发展带动干化学技术的成熟, 试剂载体品种增多, 质量提高, 特别是信号检测系统—反射光度计技术的日益完善, 使干化学分析技术不但简便快捷, 且准确可靠[5 ] 。此次检测分析表明, 干化学试纸法可为临床提供快速、准确的实验诊断参考依据。
适用于临床实验诊断中心(检验科) 急诊化验室急诊生化项目的检测。
参考文献
[1 ] 李贵星, 陆小军. 临床生化干化学和湿化学分析的初步比较[J ] . 华西医学, 2003 , 18 (1) : 69.
[2 ] 叶应妩, 王毓三. 全国临床检验操作规程(第二版) [M] . 中华人民共和国卫生部医政司编.
[3 ] 刘星楷. 干化学在临床检验中的应用及其展望[J ] . 临床检验杂志, 1989 , 7 (3) : 143～144.
[4 ] Cure H , Rand RN. Early history of Eastman Kodak ektachem slides[J ] . Clin Chem, 1997 , 43 (9) : 1647～1652.
[5 ] 文庆成, 马志荣, 师本章. 干化学分析在医学检验中的应用[J ] . 辽宁医学杂志, 1995 , 9 (4) : 173.
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